Факторы неспецефической защиты - первая лекция: Перикиси, свободные радикалы. ПОЛ, ФНО, БОФ (белки острой фазы), нуклеазы, фибронектины, интерферон, лизоцим, катионные белки, NO, лектины

ПримечаниеОчень хорошие, полные, объемные лекции. Обилие новых материалов, подробностей, научных терминов. Очень много того, чего нет в учебниках. Короче, всем рекомендую :) Кстати, открыть можно не только Лексиконом. Подойдет любой текстовый редактор, поддерживающ
Загрузить архив:
Файл: 039-0086.zip (35kb [zip], Скачиваний: 79) скачать

L[+]

ш0

   дек. 1999г.

             2НЕСПЕЦИФИЧЕСКАЯ (ЕСТЕСТВЕННАЯ) ЗАЩИТА

   Неспецифическая защита включается немедленно после появления

патогенного агента.

   Формирование компонентовнеспецифическойзащиты происходит

независимо от агрессии иявляетсячастью  развитияорганизма

(поэтому   их  называютестественнымифакторами  иммунитета).

/2800к/99/

   5Специфическая составляющая окончательно формируетсялишьв

5процессе ответа на агрессию,что является содержанием _адаптив-

_5ного (т.е. приспособительного.) иммунного ответа. /2800к/99/

   Естественная резистентность включает, как минимум, 2 звена:

   1. Первый обусловлен механическими и биологическими барьера-

ми, нормальной микрофлорой,ферментативными системами клеток,

обеспечивающими разрушение и обезвреживание чужеродных агентов,

специфическими белками крови, фагоцитами, ЕКК, соответствующими

реакциями нервнойи эндокринной систем,факторами свертывания

крови и т.д.Большую роль в формировании антиинфекционнойре-

зистентности играетвоспаление,образование  в очаге молочной

кислоты и других ингредиентов с бактерицидными свойствами.

   2. Второй механизм индуцируется при парентеральном или перо-

ральном введении в организм чужеродной сыворотки, солевых раст-

воров,высоко- и низкомолекулярных НК,полисахаридов  идр.,

что приводит к формированию так называемой 2тахифилаксии0,- по-

вышенной неспецифической устойчивости к патогенным агентам раз-

ной природы. Ключевым компонентом инфекционной тахифилаксии яв-

ляются фагоцитарные клетки. /2157к/97/

   4К неспецифическим факторам общего характера можно отнести

   4-  фильтрациянизкомолекулярныхгидрофильных токсинов через

4базальную мембрану почек;

   4-  деструкциягидрофобных токсинов в системе цитохромов кле-

4ток печени (перевод в гидрофильную форму с последующей фильтра-

4цией почками);

   4- быстрыйклиренс  ряда веществ и фрагментов деструкции па-

4ренхимой почек, селезенки, печени;

   4- локальная активация свертывающей системы крови и окружение

4инфицирующего агента фибриновой оболочкой (против чего ряд мик-

4роорганизмов синтезирует фибринолизин);

   4- зона воспаленияс  отложениямифибрина,препятствующими

4распространению микробов;

   4- отторжение некротических масс;

   4- деструкция чужеродного материала вместе с окружающей собс-

4твенной тканью перекисными и радикальными соединениями кислоро-

4да (т.е. сама воспалительная реакция)

   4- повышенное отделение слизи или экссудата, рефлексы кашля и

4чихания;

   4- кислая рН (кожных покровов, секрета влагалища, желудочного

4сока);

   4- мертвый слой эпителия наповерхности  кожи(механическая

4непроницаемость);

   4- биоценоз толстого кишечника,ротовой полости и др.(мик-

4робный антагонизм в отношении случайно попавшей микрофлоры);

   4- диарея;

   4- "биополе" (сетевое распределение сыпи,микробов или, нао-

4борот, их сосредоточение в локальной области 0──764 прорыв и выве-

4дение с некротическими массами в области локального воспаления)

   4[К факторам неспецифической защиты относят

   4- неспецифические протеазы (катепсины) лизосомальных фермен-

4тов;

   4- эритрин- вещество,  выделенное из эритроцитов с противо-

4дифтерийными свойствами;

   4- лейкины - вещества,освобождаюзиеся при разрушении лейко-

4цитов;

   4- плакины - вещества, выделяемые тромбоцитами;

   4- абластин - фактор,действующий навозбудитель  сибирской

4язвы;

   4- катионные белки,0 4 белки острой фазы (БОФ);

   4- интерфероны и ингибиторы вирусов]

   - бактериофаги /?/

   Естественным механизмам защиты присущи элементы специфичнос-

ти. Так,

   - К-клетки действуют с помощью специфических антител. /2157к/97/

   - АТ-зависимый фагоцитоз и др. /2157к/97/

   Естественная резистентность свойственна всем видам животных,

обуславливает устойчивость к химическим,физическим и биологи-

ческим агентам. По сути она не относится к иммунологическим ре-

акциям. /2157к/97/

.

                             - 2 -

                 2ЕСТЕСТВЕННАЯ ЦИТОТОКСИЧНОСТЬ

   3Эффекторные клетки0 - ЕКК, макрофаги, полиморфоядерные лейко-

циты.

   ЕКК (естественные клетки-киллеры) 5= NK-натуральные киллеры =

5NKK-натуральне клетки киллеры0 - это нулевая субпопуляция лимфо-

цитов (0-лимфоциты) со следующими маркерами.

   5ЕКК представляютсобой популяцию больших гранулярных лимфо-

5цитов с цитолитической активностью.Осуществляют первуюлинию

5защиты,уничтожая  опухолевыеклеткиили зараженные вирусами

5собственные клетки.

   _Фенотип ЕКК. 5(маркерами ЕКК являются:)

   - CD16 - слабоаффинный Fc-рецептор для Ig G и/или

   - NCAM (гомолог CD56), и/или

   - CD57, который также известен как HNK1. /2289к/96/

   5Данные молекулы экспрессируются не только на ЕК-клетках,но

5и на других субпопуляциях лимфоцитов.

   - CD69  5экспрессируетсянаЕККилимфокин-активированных

5клетках-киллерахпосле их стимуляции форболовыми эфирами (фор-

5болмиристат ацетатом - ФМА),ИЛ-2,альфа-ИФ или антителамик

5CD16. /2289к/96/0

   5- На ЕККпостоянно  экспрессируютсямолекулыадгезии  VLA

51,2,4,5,6.После  длительнойстимуляции ИЛ-2 экспрессия VLA-6

5снижается.

   5В отличиеот Т- и В-лимфоцитов у ЕКК отсутствует экспрессия

5CD3-антигена, Т-клеточного рецептора и иммуноглобулинов.0

   _Субпопуляции ЕКК.:

   - c функцией цитолиза - СD16+/leu19+/CD3-

   - с цитотоксическими функциями - СD8+/Leu7+. /7388/92/

   3Клетки-мишени0 (КМ):

   - опухолевые,

   - вирус-пораженные клетки (ВПК),

   - бактерио-пораженные клетки /?/.

   - трансплантированные клетки красного костного мозга.

   3Процесс узнавания (рецепторные структуры):

   _ЕКК лизируют клетки,лишенные HLA4I.0.

   - За  негативное распознавание 2С0-аллелей ГКГ (главного комп-

лекса гистосовместимости) отвечает белок _р55-58.. /2289к/96/

   - NKB1  (_gp-70. - гликопротеин 70кД) может быть определен как

негативный рецептор для аллелей 2В051, 5801, 2702 ГКГ. /2289к/96/

   5Различные ЕК-клоны способны специфично лизировать определен-

5ные аллогенные мишени,и на основании этогопостулировалсу-

5ществование репертуараразличных ЕК-клеток (уникальная способ-

5ность лизировать определенные аллогенные клетки). /2289к/96/

   Для объясненияроли  ГКГ 1 класса в процессе узнавания кле-

ток-мишеней ЕК-клетками, были предложены 2 теории.

   1) Гипотеза  "эффекторного  ингибирования" постулирует,  что │

_HLA4I. 0впроцессеузнавания функционирует _как негативный сигнал. │

для ЕК-клеток.Поэтому клетки с низким уровнем экспрессии4 0HLA4I0 │

(ГКГ 1) класса служат лучшими мишенями для ЕК-клеток.           │

   2) Теория "влияния мишени" предполагает,что молекулы ГКГ 1

класса илипептиды  могутмаскироватьструктуры,  узнаваемые

ЕК-клетками, по типу конформационного ингибирования. /2289к/96/

   - ГКГ В-специфические рецепторы обеспечивают негативную сиг-

нализацию (CD94 или Кр43);они представляют гомодимерные моле-

кулыи  принадлежат ко второму типу лектиноподобных трансмемб-

ранных протеинов.АТ к CD94-рецептору ЕКК способны нейтрализо-

ватьзащиту аллелей В7,В8 и В14 ГКГ (клетки начинают лизиро-

ваться ЕКК при стимуляции их ИЛ-2). /2289к/96/

   - CD44 (рецептор для гиалуроната) может усиливать спонтанную

и CD6-опосредованную АТ-ЗКЦ. /2289к/96/

   - _Молекулы адгезии и протеины теплового шока. также могут вы-

полнять роль позитивных рецепторов дл ЕКК-клеток. ИЛ-2-стимули-

рованные ЕК-клетки    способны    распознавать    реорганизацию

ICAM-2-молекул на поверхности клеток-мишеней. /2289к/96/

   -- Лигирование(=связывание)  бета-1-интегриновантителами

или фибронектином может активировать ЕКК и усиливать их АТ-ЗКЦ.

Данные функции хорошо коррелируют с экспрессиейнаЕК-клетках

_рецепторов для внеклеточного матрикса.. /2289к/96/

   _3Механизм киллинга

   _ЕКК. 4(не один фактор)0:Запуск апоптоза в опухолевых клетках.

Предположителен выброс ионов кальция из кальмодулина и  наруше-

ние метаболизма. 4Са2+, ФНО-?, цитолизины /?/. Радикалы механизм

4киллинга не опосредуют.0 4Повреждение клеточных мембран с помощью

4протеолитических ферментов азурофильных гранул. /2331к/97/0

                        7(5-7)0- ЕКК

                       7╡╢╖╕╣

                       7║0ВПК7╗

                       7╝╜╛┐└

                        790─700 - ЕКК

   _Макрофаги.: ПОЛ (МПХ),лектин-зависимая цитотоксичность опу-

холевых клеток и микробов, ФНО, интрерферон.


                             - 3 -

   _Нейтрофилы. (противоопухолевая активность ипротивВПК):  ?

(стимулируется активаторами).Механизм не обусловлен метаболи-

тами АК:радикалами кислорода, продуктами дегрануляции клеток.

/2319к,2320к/

   _Эозинофилы.: перфорины

   _3Регуляция

   - У детей появляется на 10-й неделе беременности; у новорож-

денных активность ЕКК достоверно ниже,чем у взрослых ипрог-

рессивно возрастает вплоть до зрелого возраста.

   2С3тимуляторы2 0естественной цитотоксичности

   - бактериальные экстракты (стимулируют выработку ФНО, на 40%

повышают активность ЕКК). /6145/

   - ИЛ-2, лектины (пролиферация запускается лектинами и ИЛ-2).

/6145/

   -- 4У  больных,получавшихиммунодепрессанты (при пересадке

4почек) частота опухолеобразования увеличивается в 350 раз.0

   -- 4У  детейс врожденным иммунодефицитом частота злокачест-

4венных опухолей возрастает в тысячу раз.0 (Л4960) (Нет ИЛ-2)

   - Гистамин /6145/

   - Антитела к CD69 индуцируют пролиферациюицитолитическую

активность и,по-видимому,действуют через активацию тирозин-

фосфорилазы. /2289к/96/

   3Ингибиторы

   - ИЛ-3  и др.

.

                             - 4 -

        2НЕЙТРАЛИЗАЦИЯЧУЖЕРОДНЫХ  ВЕЩЕСТВИЛИКЛЕТОК

          2РАЗЛИЧНЫМИ БИОХИМИЧЕСКИМИ КОМПОНЕНТАМИ

2I. ПЕРЕКИСИ И РАДИКАЛЫ0   (ПЕРЕКИСНОЕ И СВОБОДНОРАДИКАЛЬНОЕ

     ОКИСЛЕНИЕ липидов, белков, нуклеиновых кислот)

   Поскольку основным   субстратом  выступаютполиненасыщенные

жирнокислотные остатки мембранных липидов,эти реакции принято

называть ПОЛ. /2372к-х/

   Кислород используетсяв процессах окислительного фосфорили-

рования (примерно 90%) и на образование  активированныхкисло-

родных метаболитов (АКМ) - 0425-0,  Н4200420,  ОН5.0,НОСl,RО425.0, NО5.0.

/7041/93/

   Окисление:

   - присоединениекислорода│Источник - дыхание

   - отнятие водорода        │         - НАД.Н, НАДФ.Н

   - отнятие электрона       │         - ионы железа

   Механизм:

      Cu52+0           >рН          1. МПХ, Сl5-0,иодирование

Fe52+0───765 0Fe53+0                  ┌───────────760ОСl5-0 + МДА

       е5-0       Н5+0        Н5+0    │ 2.

О420 ────760 0425-0 ───760 Н0425-0 ───760 Н4200420 ───760 ОН5.0 + НООR ──760 ОR5.

           │      СОД         7%0 │ 3.

           └──────────────────┘ └────────────────────760 Н4200

          (супероксиддисмутаза)каталаза,пероксидаза-ПХ

ГПХ: 2Г-SH + Н4200420──760 ГSSГ + Н4200

                                 недооксиленные продукты - ?

Рис.   Схема перекисного и радикального окисления органического

        субстрата /R/ (липидов, белков, нуклеиновых кислот)

        1 и 3 пути метаболизма перекиси водорода - ферментативные,

        2 путь - неферментативный с образованием перекисейли-

                 пидов,при  которомантимикробная активность

                 перекисиводорода может усиливаться под дейст-

                 вием аскорбиновой кислоты, йодидов, кислой

     реакции среды.

О420   - супероксид

О425-0- супероксиданион

Н0425-0 4- протонированная форма

НО5.04- гидроксильный радикал

О425.04- синглетныйкислород (с параллельными спинами 2 электро-

        4нов)

   4Результат ПОЛ:

   4- рН повышается,

   4- окисление органического субстрата; перевод липидов в раст-

4воримую форму.]

   4СОДаза предотвращает поражение тканей реактивнымиоксипроиз-

4водными в условиях кратковременной нехватки кислорода,  особенно

4в ходе хирургических операций, когда нужно внезапно восстановить

4ток крови. /1998г./

   Аскорбиновая кислота (аскорбат) взаимодействует с ионами ме-

ди, железа,перекисью  водорода.Способствует ПОЛ,оказывает

бактерицидное действие.

   При недостаточностиМПХ  больныевосприимчивы

   - к кандидам и

   - стафилококковой инфекции (лечение антибиотиками). /7685/82/

   - клебсиеллам

   - кишечной палочке,

   - серрациям,

   - сальмонеллам

   - микобактериям,

   - аспергиллам

   - псевдомонас и др., имеющим каталазу. /2225к/

   ПОЛ сопровождается весьма слабой хемилюминесценцией. Хемилю-

минесценция подавляется цианидом, ЭДТА (связывают Fe52+0), усили-

вается придобавлении  ионовFe52+0в суспензию микросомальной

фракции. /2804к/

   Признак повышенного ПОЛ - блеск кожи /?/

   5(Руки светятся /блестят/ после стирки.)

   ───────────────────────────────────────────────────────────

             _Сущность свободнорадикальных реакций

   Согласно теориисвободнорадикального(перекисного) окисле-

ния, сформулированной А.Н.Бахом, окисление органической молеку-

лы кислородом протекает по принципу цепного механизма.  Инициа-

торами окисления всегда выступают свободные радикалы -  частицы


                            - 5 -

имеющие неспаренный электрон (Х5.0).

   Свободные радикалы образуются под действием различных факто-

ров,объединяемых  понятием-_ прооксиданты..К прооксидантным

факторам относятся действие света, ультрафиолетового излучения,

ионизирующей радиации.Прооксидантами являются соединения, са-

мопроизвольно распадающиеся с образованием свободных радикалов,

например диазосоединения. Свободные радикалы также образуются в

присутствии ионов переменной валентностиврезультате  одноэ-

лектронных окислительно-восстановительных реакций:

                   Fe52+0 +X  ────────760Fe53+0 +X5.

   В условиях живого организма важная роль в инициировании сво-

боднорадикальныхреакций принадлежит продуктам неполного восс-

тановления молекулы кислорода:4_   5      4 5 4_5         4 _    5       4  _

e    5    4-0 5 0e   5        0 e      5      0 e

        O420 ──────760 O425.0 ─────760 H420O420 ────────760 HO5.0 ────────760H420O

                       +2H5+0         -H420O          +H5+

               суперокись   перекись     гидроксильный

               кислорода    водорода        радикал

   Образовавшиеся свободные радикалы вступают во взаимодействие

с молекулой окисляющегося органического вещества с образованием

радикала этого вещества (2реакция инициирования цепи0):

                   X5.0+   RH  ───────760   XH  +R5.

   Радикал R5.0может реагировать с кислородом, образуя перекис-

ный радикал:      R5.0+   O420 ────────760   RO425.

   Перекисный радикал, в свою очередь, реагирует с новыми моле-

кулами окисляемого вещества,обусловливая цепной характер про-

цесса,и превращается в гидроперекись (2реакция продолжения це-

2пи0):           RO425.0 +RH ────────760   ROOH + R5.

   Чередование двухпоследних  реакцийлежит в основе цепного

характера окисления:

O420    4 0   RH      O420     5 0 RH      O42

7^    4 7    ^       ^      5 7^       ^

        R5.0 ───760 RO425.0 ───760 R5.0 ───760RO425. 0───760 R5.0 ───760RO425.0 и т.д.

                      7^                ^

                     ROOH             ROOH

   В присутствии металлов переменной валентностигидроперекиси

распадаются с образованием новых радикалов:

               ROOH+  Fe52+0 ───760RO5.0+  OH5-0 +Fe53+

   Образовавшиеся новые радикалы инициируют появление новых це-

пей окисления (2реакция разветвления цепей0) и процессокисления

приобретает самоускоряющийся, "взрывной" характер.

   Если бы свободные радикалы всегда реагировали только с новы-

ми молекулами органического вещества,то один-единственный ра-

дикал рано или поздно превратил бы в перекиси все молекулы  ве-

щества. Однако в действительности этого не происходит и процесс

окисления рано или поздно останавливается.Этомуспособствуют

так называемые 2реакции обрыва цепи0, в ходе которых радикалы ре-

агируют друг с другом,с ионами переменной валентностиилис

2антиоксидантами0 с образованием кинетически инертных молекул:

   а) R5.0 + RO425.0 ───760RO420R (молекулярный продукт)

   б) RO425.0 + Fe52+0 + H5+ 0───760 ROOH (молекулярный продукт)+ Fe53+

   в) RO425.0 + InH───760ROOH + In5.0(малоактивный радикал)

   Реакция взаимодействиярадикалов  другс другом называемая

также реакцией диспропорционирования радикалов,  сопровождается

хемилюминесценцией - испусканием квантов света. Поэтому регист-

рация хемилюминесценции широко используется как метод  исследо-

ванияреакций  свободнорадикального окисления (Ю.А.Владимиров,

А.И.Арчаков, 1972).

   Между моментами появления и исчезновения свободного радикала

происходит несколько последовательных циклов реакций с участием

радикалов R5.0и RO425.0, в результате чего на каждый появившийся в

системе радикал образуетсянесколькомолекул  гидроперекисей.

Эточисло характеризует 2длину цепи0.Длина цепи ограничивается

реакцией обрыва и сокращается в присутствии антиоксидантов, чем

иобъясняется их действие в качестве ингибиторов свободноради-

кальных процессов.

   В условиях клетки интенсивность реакций свободнорадикального

окисления во многом зависит от наличиясвободныхионов  Fe52+0,

посколькув окисленном или связанном состоянии железо неактив-

но.Восстановление ионов Fe53+0 в Fe52+0называется2регенерацией

2Fe52+0.

  ─────────────────────────────────────────────────────────────

   Перекисное окисление обязательно в определенной степени про-

исходит в норме, выполняя следующие функции.

   _3Функции физиологические:

   1. обеспечивают деструкцию чужеродного материала вфаголизо-

сомах; недостаток ПОЛ приводит к хроническому гранулематозу;

   - обеспечивает 50% гибель простейших и грибов /кандид/

     5(хлорированными и иодированными формами);

   2. инактивация ксенобиотиков (в цитохромахР-450и  других

цитохромах эпс печени, в митохондриях печени и других клеток);

   3. обеспечивает разборку мембранных структур в процессе реге-

нерации (ионыпеременнойвалентности  (титан,железо,медь,

цинк) ускоряют заживление ран /1699к/83/),


                             - 6 -

   4. регуляция вязкости мембраны (через метаболизм арахидоновой

кислоты=АК);

   - участвуют в метаболизмеарахидоновой кислоты;

   5. 4роль в онтогенезе и клеточной пролиферации;

   4- регуляция функций лимфоцитов;

   4- регуляция тонуса сосудов.

   4Почти прикаждой  патологиинаблюдается интенсификация ПО.

4Хотя есть и такие состояния,которые характеризуются снижением

4уровня ПО, например, в межприступный период астмы.

   _3Функции патологические.:

   1. ПОЛ опосредует механизм деструкции

     (-- ксенобиотиками,)

     -- при ишемии и реперфузии,

     -- в очаге воспаления (поражение тканей,  органов, клеток,

        молекул).

   Дисбаланс в  системе "АКМ (=активированные кислородные мета-

болиты)-антиоксиданты" получил название "окислительного  стрес-

са". /2220к/97/

   2. ПОЛ участвует в атерогенезе, старении. /7041/93 и др./

   3. Мутагенный, онкогенный эффект.

   4. Повышение проницаемости мембран клетокдляионов  может

привести клетку к функционально неактивному состоянию.

   5. Белки, поврежденные радикалами, запускают ИО. /7957/91ин./

   Наиболее вероятнымиисточниками  активированных кислородных

метаболитов при ишемии являются ПМЛ, ксантиноксидазная система,

митохондриальное дыхание,катаболизм АТФ,процессы деградации

АК, аутоокисление катехоламинов,реакции, иницированные ионами

металлов переменной валентности. /2220к/97/

   Свободнорадикальная патология:авитаминоз E,K, беломышечная

болезнь. /7041/93/

───────────────────────────────────────────────────────────────

   ПО повышается при              │ ПО снижается при

───────────────────────────────────────────────────────────────

   - гипероксии (статус эпилепти- │ - раке,

     кус, легочная дисплазия ...) │ - хроническом гранулематозе

   - гипоксии, реоксигеназный     │   (недостаточности МПХ)

     парадокс (восприятие нормаль-│ - в межприступный период

     ного уровня кислорода как    │   бронхиальной астмы

     избыточного)                 │ - трисомии 21 (ген СОД в 21

   - интенсивной мышечной деятель-│   хромосомы, поэтому его

     ности                        │   синтезируется на 50% боль-

   - старении,                    │   ше нормы (синдром Дауна -

   - воспалительных процессах     │   дети гибнут от инфекции

     (острых и хронических)       │   из-за недостаточности ПО)

   - воздействии радиации         │ - избытке витамина Е

   - курении                      │

   - химических отравлениях       │

     (ССl440,паракватом,различными│

     канцерогенами - бензпиреном│

     и др.                        │

   -- лекарственной гемолитической│

     анемии (фенилгидразиновой..) │

   - дефиците витаминов Е и А     │

   - при наркоманиях              │

     (морфин, 105-60М) /2319к/      │

                                  │

                                  │

───────────────────────────────────────────────────────────────

   - симптом каменного сердца (не отвечает на раздражители)

   5Под действием оксидантов в В-клетках повышается фосфорилиро-

5вание по тирозину (тирозиновая протеинкиназа). /2228к/

   4Гипоксия иишемия  являютсяуниверсальными патологическими

4процессами, нарушающими метаболизм и функции клетки  приболь-

4шинстве критических состояний.Независимо от причин гипоксии и

4ишемии, в основе нарушений лежат дефицит энергопродукции иак-

4тивация процессовПОЛ.Возникает  своеобразный порочный круг:

4недостаток кислорода нарушает энергетический обмен и стимулиру-

4ет свободнорадиальные процессы в клетке,а активация свободно-

4радикального окисления ведет к повреждению мембран  митохондрий

4и углубляет энергетический дефицит. /7956/96/

                   5Регуляторы ПОЛ /7041/93/

5──────────────────────────────────────────────────────────────

       5ОКСИДАНТЫ             │        АНТИОКСИДАНТЫ

       5ИНДУКТОРЫ             │

5───────────────────────────────────────────────────────────────

   5Ионы 2-валентного железа│ I. ГИДРОФОБНЫЕ

   5медь                      │    - токоферол (витамин Е)

   5МПХ0                       5│    - каротин, витамин А

   5кислород (гипероксия)0     5│    - насыщенные ЖК

   озон                      5│0    5- ЛПВП0 5(2368к)

   диоксид азота             5│    - холестерин


                             - 7 -

   эндопероксиды             5│II. ГИДРОФИЛЬНЫЕ

   ФАТ, ИЛ-1, ФНО ──760 АК     5│ 1. Ферментативные

   5ионизирующая радиация0     5│   - каталаза, ПХ,СОД

   5УФ облучение0              5│   - селен-содержащие ГПХ,

   5загрязнители воздуха0      5│     глутатионтрансферазы

   5(ксенобиотики) 0           5│ 2. SH-содержащие соединения

   5свободные радикалы табач-0 5│    (тиоловые соединения)

             5ного дыма0       5│   - цистеин, цистин, метионин

   5некоторые химические ве-05│   - тиолы, восстановленный

             5щества пищевого0 5│     глутатион

             5рациона0         5│   - трипептид (цис-глу-гли)=GSH

                             5│ 3. Соединения, содержащие

                             5│    енольные группы

   5Стимуляторы ПОЛ:0          5│   - аскорбиновая кислота - ?

5- цисполиеновые ЖК0           5│   - фенольные антиоксиданты

5- детергенты и сурфактанты0   5│ 4. Хелатные соединения

5- лектины0                    5│    (связывающие металлы

5- АТ (ИК)0                    5│    переменной валентности)

5- компоненты комплемента0     5│   - ферритин,

5(опсонины)0                 5│   - трансферрин,

5- хемотаксические факторы0    5│   - лактоферрин,

5- опсонины 0                  5│   - церулоплазмин,

5- форболмиристатацетат /7531/│ 5. Другие

                             5│   - _этанол

                             5│   - гепарин

                             5│   - молочная, лимонная кислоты-?

                             5│   - мочевая кислота,

                             5│   - некоторые пептиды

                             5│0   5- селен

                             5│ Антигипоксанты

                             5│   - гутимин,

                             5│   - амтизол

                            5│   - триметазидин /7956/96/

                             5│ Актопротекторы (усиливают

                             5│ синтез белков, в т.ч. и анти-

                             5│ оксидантов /7956/96/

                             5│   - бемитил

                             5│   - этомерзол

                             │5 Гистидин (является"уборщиком"

                             │5 гидроксильного радикала   /2319к/

                             │ Ниацин /?/

                             │ Глютатион-S-трансфераза

                           5трансферрин, ферритин

                           5церулоплазмин

                           гемопексин

                           гаптоглобин

5───────────────────────────────────────────────────────────────

   При дефиците токоферола (витамина Е) развиваются тяжелые по-

ражения тканей (некротические очаги в печени,мышечная дистро-

фия, гемолиз эритроцитов в крови, поражение нервной ткани, сте-

рильность гонад).

   И наоборот, повышение концентрации антиоксидантов может выз-

вать рецидивинфекционного  воспаления(подавление деструкции

фагоцитируемого материала ──760 незавершенный фагоцитоз).

   _Селен.. Биологическая роль селена обусловлена еговключением

в состав антиоксидантных ферментов:ГПХ, фосфолипидгидроперок-

сидглютатионпероксидазы ифосфолипидгидропероксидГПХ.  Селен

входит также в состав 5'-иодотирониндеиодиназы.Уровень селена

снижается при ревматоидном артрите. /2240к/95/

    5МЕХАНИЗМ

   51. Ферментативное

      5- включается в нормальный метаболический процесс (в учас-

5тием НАДФхН

   52. Неферментативное

      5- использует в качестве восстановителя железо иаскорби-

5новую кислоту.

.

                             - 8 -

   2II. НУКЛЕАЗЫ (ФИА - ФАКТОРЫ, ИНДУЦИРУЮЩИЕ АПОПТОЗ)

   Нейтрофилы секретируют факторы,индуцирующие апоптоз разных

клеток-мишеней (_2апоцитоз.0 окружающихклеток).  Всвоивакуоли

нейтрофилы выделяют фактор,индуцирующие апоптоз (ФИА) клеток,

которые разрушают геном микробов. Это ферменты с высокой нукле-

азной активностью (_нуклеазы.). При массивном проникновении в ор-

ганизм инфекционных агентов нейтрофилы активно поглощают микро-

бы и,не заботясь об их истинном переваривании,выбрасывают в

межклеточное пространство значительные количества ФИА. Цель ре-

акции-  произвестив сжатые сроки как можно более выраженное

_повреждение генетического аппарата микробов.. ФИА губительны для

всех клеток:они способны осуществить деградацию НК генома лю-

бых биосистем - эукариот, прокариот, вирусов. Нейтрофильные ФИА

индуцируют ускорение апоптоза и у самих нейтрофилов. /2226к/97/

   Фагоцитоз и апоцитоз - разные,но функционально сопряженные

процессы.Нейтрофилы с помощью ФИАинициируют  воспалительную

реакцию.Процесс  воспаления-это реакция организма на ФИА.

/2226к/97/

   Нейтрофилы - это клетки,у которых включена генетически за-

данная программаклеточной гибели.На поверхности нейтрофилов

по прошествии некоторого времени появляются структуры,  которые

обусловлены апоптозомикоторые  узнаютсямакрофагами (САН -

структуры апоптоза нейтрофилов). Фагоцитоз "старых" нейтрофилов

осуществляется макрофагами. /2226к/97/

    2III. ФАКТОР НЕКРОЗА ОПУХОЛЕЙ0 (ФНО=TNF)

        (6490,6493,6501/89;9-53-530-91)

   В конце  ХIХвекаамериканский ученый Уильям Коле заметил,

что инфекционный процесс у больных опухолями ведет к  регрессии

и даже исчезновению опухолей. Это наблюдение использовали затем

для лечения опухолей путем преднамеренного заражения слабопато-

генными микроорганизмами(стафилококком,ослабленным  штаммом

энтеровирусов и др.) Лечебным эффектом обладала также сыворотка

инфекционых больных. /1318/90/ В 1851г. Latour лечил опухолевые

заболевания введением живых трепонем, а Busch - инъекциями воз-

будителя рожи.В начале ХХ века Adam и Much начали применять в

леченииопухолевых и инфекционных заболеваний лизаты,белки и

липиды ряда бактерий. /2341к/94/

   Это дало  повод к поиску антитуморогенного фактора.ФНО был

обнаружен в 1975г. Карсвеллом.

   Альфа-ФНО - синтезируется многими клетками (в т.ч.макрофа-

               гами = кахектин)

   бета/?/ -ФНО  - продукт только Т-лимфоцитов (= лимфотоксин -

               альфа и бета)./1666к/94,2283к/96, 2460к/95//

(Белки гомологичны на 30-50% по первичной структуре /7471/.)

   _Биохимия

   М. кахектина 17кД /6496/90,7471/; три идентичные субъединицы

/6498/. Предполагается, что металлопротеин. /2376к/ (Синтезиру-

ется как прогормон, встраивается в мембрану, затем выделяется.)

   Альфа и бета-ФНО имеют общий рецептор. /1666к/94/

   Количество рецепторов к альфа-ФНО на 1 нейтрофиле составляет

2-6 тысяч при 45о0С и около 600 при 375о0С (деградирует-?). /2273к/

   4Механизм активации ФНО протеинкиназы С:0 4ФНО 0──764 рецептор для

4ФНО 0──764 активация фосфолипазы С 0──764 гидролиз ФХ 0──764 фосфорилхо-

4лин и ДАГ (увеличение уровня 1,2-диацилглицеролаз /ДАГ/  (через

415с.) 0──764 активация протеинкиназы С. /2366к/91/

   _Синтез

   В норме ФНО обнаружен только 2в фагоцитах 0(макрофагах и нейт-

рофилах)4. ФНОсинтезируется у больных артритом0 4мононуклеарными

4клетками синовиальной жидкости /6494/;в ткани легкихбольных

4туберкулезом(при  туберкулезе и фиброзе в клетках эндотелия);

4астроцитами под действием ЛПС /6493,7637/91/, ЭК (под действием

4ЛПСлейкоциты прилипают к поверхности ЭК и проникают через эн-

4дотелий; ФНО локализуется на поверхности мембраны). /7585/92/0

   Стимуляторы синтеза - эндотоксины (ЛПС и др.-?). ИЛ-1-?

   4Гены в районе НLА III класса (6 хромосома).

   _2Биохимические свойства и выполняемые функции

   3Социальный уровень

   5При введении животным ФНО развиваетсякартина,характерная

5для септическогошока(повышается  температура /опосредованно

5через ИЛ-1-?/, развивается тахикардия, повышается уровень адре-

5налина,снижается количество лейкоцитов).(ЖМЭИ-94-N3; 6488/87/

5ФНО увеличивает сосудистую проницаемость  засчетобразования

5щелей между ЭК. (ЖМЭИ-94-N3-С.119)

   5При развитии толерантности к ФНО развивается толерантность и

5к эндотоксину./6488/ Иммунизация ФНО животных приводит к сни-

5жению летальности;Летальный исход удается затормозить АТ-ми к

5ФНО. (ЖМЭИ-94-N3-119)

   - _Вызываетлихорадку./1666к/94/,  наиболее ранний цитокин,

выделяющийся при индикации сепсиса. /2359к/

   _Введение здоровымлицам.  ФНОприводитк  повышению на 30%

энергозатрат организма (через ЦО-ую систему); механизм блокиру-


                             - 9 -

ется ибупрофеном.Развиваетсягипогликемия через 2 часа после

введения, липолиз (мобилизация ЖК из жировой ткани  ──760  печень

──760 синтез /?/),повышается протеолиз в мышечной ткани, усили-

вается синтез белка в печени. /2359к/93/

   _Системное введение7 a0-ФНО. животным (0,6 мг/кг) приводит к це-

лому ряду пуатологических состояний /7638/:

   - ацидозу,

   - диарее /7638/92/,

   5- нейтропении0,

   - отеку легких /2292к/,

   - гипотонии (падению АД),

   - шоку  (ФНОиэндотоксин  синергически активируют систему

     комплемента,вызывают шок и повреждение толстого кишечни-

     ка; дефицит С5 предотвращает шок /6168/91/).

   У человека длительная выработка ФНО может привести к

- учащению дыхания (тахипноэ) [через активацию метаболизма ара-

хидоновой кислоты и повышенный синтез лейкотриенов /6497/],

- истощению белков и липидов,

- анемии,

- _кахексии. при персистирующей продукции /6501/,

- клетальному исходу,поэтому ФНО называют "летальным факто-

ром".

   3Организменный уровень

   _Уровень альфа-ФНО повышается при

   - инфаркте миокарда,

   - вирусном гепатите,

   - роже,

   - инфекционном мононуклеозе,

   - иерсиниозе,

   - менингите (опосредует эндотоксический шок),

   - сепсисе,

   - трихинеллезе. /7955/92/

   - при коллагенозах,

   - у больных с грибовидным микозом,

   - при миеломной болезни/2376к/,

   - уровень ИФ коррелирует с тяжестью СПИДа.

   - при псориазе (реакция на суперантиген кожи) /2376к/

5ФНО-альфа является ключевым цитокином при псориазе. Считают,

5что псориатическиепоражения начинают образовываться под влия-

5нием ИЛ-1 и альфа-ФНО,синтезируемых кератиноцитами, активиро-

5ванными под влиянием внешних факторов. /1666к/94/

   _Уровень ФНО снижается

   - при тяжелом атопическом синдроме. /2376к/

   _Свойства

   1) Стимуляция иммунитета хозяина (организма). /7827/93/

   2) Снижение кровяного давления. /2292к/

   3) Шок. /2292к/

   3Системный уровень

   1) Пирогенность (прямое действие на гипоталамус). /2292к/

   2) Усиливает ангиогенез. /1666к/

   3) Стимулирует лейкопоэз (нейтрофилов). /2292к/

   3Тканевой/органный уровень

   1. 1Цитотоксическое/цитостатическое действие на _опухоль.0.

   Механизмы:

   - ФНО-альфа  вызываетфрагментациюядерной  ДНК опухолевых

клеток,а ИЛ-1 убивает опухолевые клетки с рецепторами к нему.

/2348к/95/

   4(ИЛ-1 способен самостоятельно убивать меланому А375.Воз-

4можно, черезИЛ-1осуществляется естественная цитотоксичность

4моноцитов. /5694/87/)

   4Сходство с ИЛ-1 (по-видимому,из-за сходства индуцирующихся

4ими цитокинов) /7472/:

4- цитоцидный эффект на клетки некоторых опухолей;

4- индуцируют повышение температуры тела;

4- стимулируют продукцию хемотаксического  фактора(NAP-1)для

4нейтрофиловмоноцитами  ифибробластами человека;

4- вызывают воспаление,фиброплазию,ангиогенез;

4- сходно воздействуют на эндотелиальные клетки /ЖМЭИ-94-N3-С.110-114/

4- индуцируютэкспрессиюрецепторов к ИЛ-2,образование ИЛ-6,

4колониестимулирующих факторов, БОФ;

4- радиопротекторные свойства

   - Через ИФ.

   4Ряд опухолевых клеточных линий чувствительны к действиюод-

4ного ФНО,другие - к совместному действию с гамма-интерфероном

4(лимфоцитов).Часто усиление злокачественности опухолевых кле-

4ток коррелирует с увеличением чувствительности к ФНО.Нетранс-

4формированные клетки не чувствительны даже к  комплексусИФ.

4/6490/ ФНО - индуктор дифференцировки клеток-опухолей. /6499/

   - Через тромбопластин ЭК.

   Альфа-ФНО повышает экспрессию тканевого фактора, что повыша-

ет коагуляционный потенциал в местах воздействия.В ткани фиб-

росаркомы(мышей)  ФНОприводитк свертыванию крови (выбросу


                            - 10 -

тромбопластина) и тем самым к противоопухолевому эффекту. /0041/

Деструкция сосудистой цепи опухолей./7827/93/ 4Прокоагулянтная

4активность блокировалась моноклональными антителами к тканевому

4фактору. /0041/

   - Через ЕКК. Усиливает активность ЕКК. /2157к/

   2) Стимуляция синтеза БОФ (активация гепатоцитов). /2292к/ В

то жевремя  ИЛ-1иФНО-альфа подавляют синтез некоторых БОФ

(фибриногена, гаптоглобина), индуцируемых ИЛ-6. /2294к/95/

   3Клеточный уровень

   1. ВПК (вирус-пораженные клетки).

   Принимает участие в 1уничтожении клеток,зараженных вирусами

везикулярного стоматита и простого герпеса,  по-видимому, инду-

цируя продукцию ИЛ-6.

   2. Подавляет размножение трипаносом, малярийного плазмодия.

   3. _Лейкоциты..

   - Активирует лейкоциты (макрофаги, лимфоциты).

   Усиливает продукцию макрофагами ИЛ-1,ИЛ-6, ИЛ-8, ФАТ, лей-

котриенов /ЛТ/, ТХ А2, простагландинов /Pg/. 4Аутокринная секре-

4ция.0 /2292к/

   - Оказывает  иммуностимулирующее действие на Т- и В-лимфоци-

ты,ЕКК. Стимулирует синтез АТ в культуре клеток. /2283к/

   Стимуляция ГЗТ (образование гранулем). /2292к/

   - Стимуляция фагоцитирующих клеток. /2283к/

   5Повышает естественную резистентность за счет активациимак-

5рофагов и гранулоцитов , повышения кислородного метаболизма фа-

5гоцитов. /7073/

   - Стимулирует   фагоцитоз,  активируетАТ-ЗКЦнейтрофилов.

/2273к/

   5- Влияет на активность нейтрофилов(хемотаксис,адгезию  к

5ЭК, секрецию перекиси водорода; освобождение лактоферрина), эо-

5зинофилов, Т- и В-лимфоцитов, ЭК. /6499/

   5- Индукция экспрессии различных молекул адгезии, Fc-рецепто-

5ров, АКТГ,онкогенов /6496/;стимуляция  продукциицитокинов

5(ИЛ-1,6, ксф), . /6496,7173/

   4. _ЭК.

   - Повышение адгезивности ЭК (усиление экспрессииадгезивных

молекул),нейтрофилов,  эозинофилов, базофилов, моноцитов и (в

меньшей степени) лимфоцитов. /2292к/95/

   - Стимуляция экспрессии тромбопластина ЭК-ми. /2292к/95/

   - Повышение проницаемости сосудов(прямая  токсичностьдля

эндотелиальных клеток). /2292к/95/

   - Повышает экспрессию АГ-ов ГКГС классов I и II на ЭК и фиб-

робластах. /1666к/

   4. Индуцирует синтез ИЛ-1,6,8,ВПМ-1, ТФР-альфа в культиви-

рованных _кератиноцитах.. /1666к/ Активный синтез ФНО-альфа в ко-

же связывают с процессами реэпителизации. /2376к/

   5. Стимуляторсинтеза  1коллагеназы0  _синовиальнымиклетками

/6490/86/,_фибробластами. /6494/89/. ─────760 резорбция костной и

хрящевой ткани.Стимуляция роста фибробластов. /6490/ Способс-

твуют обновлению костной и хрящевой ткани.

   ФНО-альфа стимулируетангиогенез  и увеличивает митогенез и

инвазивную миграцию фибробластов (физиологическая  рольФНОв

регуляции процесса заживления ран). /2376к/

   Повышает экспрессиюАГ-ов ГКГС классов I и II на фиброблас-

тах. /1666к,7638/92/

   6. _Жировые клетки. (подавление активности липопротеинлипазы и

метаболизма жировых клеток). /2292к/

   7. Клетки _мышц. (снижает мембранный потенциал,ослабляет сок-

ратительную активность кардиомиоцитов; истощение энергетичекого

потенциала мышечных клеток). /2292к/

   8. ФНО-альфа регулирует пролиферацию и дифференцировку гемо-

поэтических предшественников. /2376к/

   3Субклеточный уровень

1. 1Активатор ПОЛ0, что приводит к повреждению тканей и разви-

тию воспалительной реакции.ФНО - медиатор в патогенезе инфек-

ционноговоспаления.  Например,присептицемии   наблюдается

сверхпродукцияФНО с последующим поражением сердца,сосудов и

других органов,развитие септического шока. Уровень ФНО значи-

тельно повышен при септицемии, а также у больных СПИДом./7073/

   ──760 Бактерицидный эффект

   ФНО (и  КСФ)усиливаетпродукцию  супероксидныхрадикалов

(О52-0) и хемотаксис нейтрофилов /2360к/94/ особенно в  ответна

С5а и FMLP (f-met-leu-phe).5Однако цитокин не усиливал генера-0 │

5цию радикалов при стимуляции нейтрофилов форбол миристат ацета-0 │х

5том.0 /2364к/92/                                                 │

   2. Альфа-ФНО,лимфотоксины  альфа и бета используют один ре-

цептор. Функциональная неполноценность или недостаток рецепторов

к ФНО вызывает выраженный иммунодефицит (ИД). Мыши при этом при-

обретают высочайшую чувствительность к инфекции Listeria monocy-

togenes. /2460к/ Вместе с тем приобретается резистентность к ле-

тальному действию ЛПС (липополисахаридаГ-бактерий).  Делеция

генарецептора приводит к 4полному отсутствию ЛУ в организме0 де-

фектного животного, резистентности к летальному эффекту ФНО-аль-

фа,   отсутствие  кожнойреакциина  интрадермальноевведение


                            - 11 -

ФНО-альфа. /2460к/

   2. Противовирусная активность. /2283к/

   3Биохимический уровень

   1. Активатор метаболизма 1арахидоновой кислоты 0с образованием

простагландинов (Pg E420 ──760 иммунодефицит) и лейкотриенов.

   -  Стимулирует синтез Pg E2 клетками передней доли гипофиза.

/7774/88/

   2.

   - повышает экспрессию АГ-ов ГКГС классов I и II на ЭК и фиб-

робластах,

   - индуцирует синтез ИЛ-1,6,8, ВПМ-1, ТФР-альфа в культивиро-

ванных кератиноцитах. /1666к/

   3. Активирует NO-синтетазу,вызывающей образование NO-реак-

тивных метаболитов. ИЛ-10 ингибирует NO-синтетазу. /2294к/95/

   3Физический уровень

   Обладает радиопротективными свойствами. /7472/

   _4Регуляция

   4[Система ФНО включает

4- 2 лиганда (альфа- и бета),

4- два рецептора (к альфа и к бета),

4- два ингибитора - ФНО-связывающие протеины I и II./7470/91/

   4Рецептор к ФНО  входит в семейство рецепторов фактора роста

4нервов, антигенов лимфоцитов (ОК-40-Т-лимфоциты, СД-40-В-лимфо-

4циты). Рецепторимеетсяна миелоидных клетках,эпителиальных

4клетках, на клетках плаценты, легочных фибробластах; в сыворот-

4ке больных раком. /6503/]

   2IV. ФИБРОНЕКТИНЫ

   (от слов "fibra" - волокно; "necter" - cвязывать; с англ.)

   Это белки - "мусоросборщики" (представляющие собой"контей-

нер для мусора").

   _Биохимия

   Группа нерастворимых на холоду гликопротеинов с М.400-450 кД.

   Димеры (с М. по 220 кД).

   45% молекулы - углеводная часть (в т.ч.манноза,галактоза,

4N-ацетилглюкозамин, сиаловые кислоты).

   Концентрация - 300 мг/л. Содержание увеличивается при воспа-

лении иуменьшается  (вторично)приинфекционных процессах и

сепсисе,хирургических  вмешательствах,  ТГС-синдроме,ожогах

вследствииповышенного потребления.Концентрация фибронектина

после его тотального удаления восстанавливается  через2дня.

Стабильнонизкий уровень фибронектина ассоциирован с неблагоп-

риятным прогнозом заболевания.

   4[До одного года концентрация фибронектинов удетейнизкая,

4затемдостигает  уровнявзрослыхи остается стабильной до 15

4лет.С возрастом концентрация увеличивается примерно в полтора

4раза.]

   Делятся на 1растворимые0 (циркулирующие в виде димеров) и  1не-

1растворимые0, соредоточенные в соединительной ткани.  4Располага-

4ются на поверхности клетоксоединительнойткани  ибазальной

4мембраны и в экстраклеточной жидкости мезенхимальных тканей.0

   _Функции

   1. Опсонин,   обуславливая  фибронектин-зависимыйфагоцитоз

(участвует в очищениираневойповерхности  ивоспалительного

очага). Удаление фибронектина из крови приводит к  снижениюее

фагоцитирующих свойств в 2 раза.5Рецепторы к фибронектину име-

5ются на макрофагах и нейтрофилах. /7061/0

   Фибронектины связывают гликопротеиды

- стафилококков (St.aureus),

- стрептококков (группы А,С,G),

- трепонемы паллидум /2745к/,

- дрожжей, кандид,

- вирусов - гриппа, парагриппа, паротита),

- строму клеток, актин, коллаген, ДНК, фрагменты тканей,

- иммунные комплексы,

- гепарин, желатин, ионы кальция, компоненты С3 и С1q.

   4[Тейхоевые кислоты Г+ бактерий микробов ингибируютсвязыва-

4ние фибронектина с микробами, исключая перечисленные.]

   2. Регулирует адгезию и пролиферациюмигрирующих  клетоки

эндотелиальных клеток;

   3. Регулирует образование соединительной ткани: после травмы

откладывается в местах повреждения вдоль нитей фибрина  (синте-

зируемый эндотелиальнымиклетками и фибробластами);формирует

криопреципитаты (фибронектин-фибрин) при ревматоидном  артрите,

системной красной волчанке, системном склерозе;

   _Синтез

   Синтезируются гепатоцитами,фибробластами,эндотелиальными

клетками (+ макрофагами,нейтрофилами,тромбоцитами, миоцита-

ми).

.

                            - 12 -

   2V. БЕЛКИ ОСТРОЙ ФАЗЫ0 (БОФ; = адаптивные белки)

   4[Острое активное воспаление длится до 2 недель;хроническое

4- более 1,5 месяцев.Для острого воспаления более типичны экс-

4судативные реакции, для хронического - пролиферативные./420/]

   БОФ включают белки, содержание которых резко меняется в ост-

рую фазу воспаления:

   - 2"негативных"0 снижается (преальбумин,альбумин,трансфер-

             рин,апоА1, апоА2, гистидин-обогащенный гликопро-

             теин (гистидин является "уборщиком" гидроксильного

             радикала   /2319к/),   интер-7a0-ингибитор   трипси-

             на,7a02-HS-гликопротеин).

   - 2"позитивных"0 значительно (дажетысячекратно)повышается.

Для того, чтобы не повышалось онкотическое давление, пропорцио-

нально падает синтез альбуминов ("негативная реакция").

   Наиболее ярким показателем воспалительного процесса являются

орозомукоид, антитрипсин,СРБ,концентрация  которыхлишьв

очень редкихслучаях не изменяется при остром воспалении.При

остром воспалении в 2 и более раз повышается содержание  фибри-

ногена, гаптоглобина, орозомукоида. /2809к/85/

   _Биохимия БОФ.. Большинство БОФ - гликопротеиды.

   5М. БОФ - 12-340 кД, содержание углеводов - 8-45%. /6902/

   5Все БОФ,за исключением СРБ,являются сиаловыми кислотами.

5/6902/0 5Включают большое количество отрицательно-заряженных сай-

5тов. /6902/0

   Синтезируютсягепатоцитами.

   _Синтез стимулируется

   - ФНО-7a0,

   - ИЛ-1, ИЛ-6, ИЛ-11,

   - гамма-ИФ,

   - трансформирующим фактором роста (ТФР-7b0),

   - ciliary  нейротрофическим фактором,

   - лейкемия-ингибирующим фактором,

   - бактериями и вирусами,

   - при аутоиммунных процессах,

   - пр тромбозах,

   - при травмах /6902/

   _Синтез ингибируется

   - инсулиом, okadaic acid,

   - глюкокортикоидами(снижают уровень ИЛ-1 и повышают актив-

ность печени.

                        Содержание БОФ

─────────────────────┬───────────────┬─────────────────────────

                     │    В норме    │При остром воспалении

─────────────────────┼───────────────┼─────────────────────────

                     │               │

СРБ    (усл. ед.)    │70 нг/мл,т.е.│    0,1 г/л

                     │почти нет      │

   - у новорожденных │100 нг/мл с    │

                     │постепенным    │

                     │возрастанием   │

                     │               │

Фибриноген           │2-4 г/л        │

                     │3-4 г/л        │    6-10 г/л

Гаптоглобин (Нр)     │170-300мг/л    │

                     │(70-150 мг%);│

                     │830-2700мг/л   │

         │0,1-0,04г%     │

                     │0,6-1,8 г/л    │    3-6 г/л

Преальбумин          │3007+020 мкг/мл│

Орозомукоид (Оm)     │550-1400 мг/л│

                     │= мкг/мл       │

                     │0,6-0,9 г/л    │  1,5-3 г/л

Антитромбин-III      │210-300 мг/л   │

С3-компонент         │550-1200 мг/л│

комплемента          │1,3-1,7 г/л    │  2-3 г/л /2809к/

                     │100 мг%        │

С1q-субкомпонент     │100%           │

комплемента          │               │

Трансферрин          │30307+0350 мкг/мл│

Церулоплазмин        │2607+030 мкг/мл│

                     │0,3-0,6 г/л    │  1-2 г/л

альфа-2-макроглобулин│21507+0150 мкг/мл│

                     │(500-2500 мг/л)│

альфа-1-антитрипсин│22018+0200 мкг/мл│

─────────────────────┼───────────────┼─────────────────────────

4альфа-1-антипротеаз- │2,5-4,0 г/л    │ 5-7 г/л

4ный ингибитор /???/│               │                -?

                    4- 12,5%углеводов.   Угнетает   активность

4трипсина, химотрипсина,эластазы, коллагеназы, тромбина, плаз-

4миногена, ренина,в некоторой степени - калликреина.М. 50-55


                            - 13 -

4кД, поэтому легко покидает русло крови, выходит в интерстиций и

4взаимодействует с протеиназами ткани.Отличается высоким поли-

4морфизмом. Дефицитсопровождается обструктивными легочными за-

4болеваниями (эмфиземойлегких)и  прогрессирующимювенильным

4циррозом. Забоелваниеразвиваетсяу  больных в возрасте 30-40

4лет. Механизмы неясны.  Предположительнодефицитингибитора

4сопровождается повышенным действием эластазы, коллагеназы нейт-

4рофилов в месте начинающегося воспаления, что приводит к лизису

4основного веществатканилегких  и развитию обширных воспали-

4тельных очагов. /2809к/85/

─────────────────────┴───────────────┴─────────────────────────

   4+ кининоген, прекининоген /?/

   4- ангиотензиноген /?/

   2БОФ делят на 3 группы:

   _А. Транспортныебелки. (преальбумин и металл-содержащие бел-

ки, предотвращающие ПОЛ)

   В процессе воспаления при разрушении эритроцитов может выде-

ляться Hb, стимулирующий процессы ПОЛ.

   - 2Преальбумин0 транспортирует витамины и гормоны.

   - 2Гаптоглобин0 /Hp;М. 40кД/

     -- связывает свободный гемоглобин. Комплексы захватываются

        клетками РЭС /205/,не фиксируютсяклубочками  почек,

        что предотвращает гемосидероз почек./2809к/85/ Период

        полувыведения из кровикомплекса  Нв-Нр10-20минут.

        Комплексы распадаются в гепатоцитах печени. /2809к/85/

     -- Участие в процессах детоксикации.Нр  комплексуетсяс

        различными белковыми и небелковыми веществами, появляю-

        щимися при распаде клеток поврежденной ткани,в т.ч. с

        протеазами (например,катепсином В, D, некоторыми ком-

        понентами АПК). /2809к/85/

     -- Иммунореактивный белок.

     -- Обладает иммунопероксидазной активностью.

   5Синтезируется печенью и в тканях, входящих в состав рэс: се-

5лезенке,ЛУ,тимусе.

   5Разделяют 3 типа белка0:

   -5- Hp 1-10 (М. 85 кД)5,

   -- 5Hp 1-20 (М. ??????????????????)5,

   -- 5Hp 2-20 (М. 160 кД)

5(у человека0 5по одному из них).  /205/0 5Недостаточность Hp встре-

5чается редко./420/0 Молекулярная структура напоминает строение

иммуноглобулинов. /2809к/85/

   -- Содержание повышается в 3-5 раз при инфекционныхпроцес-

сах /1695/ и развитии опухолевых процессов. Выявлена корреляция

между концентрациями гаптоглобина и  орозомукоидаидиаметром

опухоли. /269/

   -- Уровень снижается при гемолитической анемии, не определя-

ется послепереливания несовместимой крови./284/ При его не-

достатке может развиться пароксизмальная ночная  илихолодовая

гемоглобинурия.

   - 2Гемопексин0 связывает свободный гем.

   - 2Трансферрины0 (в т.ч. лактоферрин)

     -- транспортируют железо к клеткам эритрона; ("негативный"

        белок);

     -- проявляютантимикробные  свойства (связывают железо из

        питательной среды).

   - 2СОД0 (супероксиддисмутаза) - антиоксидант,

   - 2Церулоплазмин0 (ЦПЗ). М. 124-134 кД /2809к/85/.

     -- транспортируетмедь  впечень (экскреция с желчью для

        удаления из организма) ик  медьсодержащимферментам.

        /2809к/85/

     -- стимулирует эритропоэз

        (является колониестимулирующим фактором);

        5Связывает медь и т.о. осуществляет его детоксикацию.

     -- является акцептором супероксидных радикалов (ЦПЗназы-

        вают "внеклеточной СОД"),т.е.осуществляет антиради-

        кальную защиту. /6902/

   _Б. Белки системы комплемента. - С3, С4, С1q, комплекс С56.

5С1q /?/-  стимулирует первичныйиммунный ответ,

5С1-In

5С2,С4,С4вр0,

5С3,С5,ф.В - в расщепленном виде являются опсонинами (С3в) и хе-

        5мотаксическими агентами (С5а).

5С9/7528/

   _В. Белки со специфическими функциями

   - Факторы  ССК (2фибриноген0 /предполагая активацию свертываю-

     щего процесса/, ф. Виллебранта);

     2Фибриноген0 -белок,  переходящий под действием тромбина в

                   фибрин. М. 340 кД. Углеводный компонент сос-

                   тавляет 4-5% массы белка. Свойства белка:

     -- участие в _свертывании крови.; продукты деградации фибри-

        ногена  ифибринаобладают противосвертывающей актив-


                            - 14 -

        ностью; что способствует восстановлению кровотока в зо-

        не воспаления;

     -- в  интерстициальной ткани фибриноген создает основу для

        фибробластов и гистиоцитов (в фибриновый матрикс мигри-

        руют фибробласты) и способствует _заживлению ткани.; пос-

        ле синтеза коллагена впораженном  участкеобразуются

        новые капилляры и восстанавливается нормальное строение

        ткани;

        --- При недостаточности фибрин-стабилизирующего фактора

(фактора XIII) раны долго (месяц)незаживают,  а

особиженского  пола остаются бесплодными (кстати,

гемофилии А нет у женщин).

        --- Тромбопластина много в яйцеклетке.

     -- повышенная концентрация фибриногена и фибрина в повреж-

        денной  ткани усиливает миграцию в нее гранулоцитов и в

        то же время они принимают на себя _основной удар. со сто-

        роны _протеиназ. лейкоцитов и повреждающих клеток ткани.

        --- Продукты расщепления фибриногена и фибрина являются

хемотаксическими агентами,приводящими к скоплению

в месте повреждения лейкоцитов. Активированные лей-

коцитыначинают  продуцироватьряд физиологически

активных веществ (интерлейкины, фактор некроза опу-

холей,факторы роста,интерфероны),  роль которых

сначала заключается в стимуляциисинтезасоедини-

тельно-тканных элементов  и пролиферации (деления)

клеток, а затем после изменения соотношения регуля-

торовначинается  вторая фаза регенерации - выброс

коллагеназы для растворениялишней  соединительной

тканиизапускмеханизма апоптоза - самоубийства

клеток.В литературе описана версия, что у лиц при

сниженнойапоптозной  способностиклеток в данный

период может инициироваться опухолевый процесс.

   - 2Орозомукоид0 (его содержание повышается прионкологических

заболеваниях). М. 44 кД. 440% массы составляет углеводный компо-

4нент.0 Ингибирует катепсин С. Функция неизвестна. /2809к/85/

   2Ингибиторы ферментов0 (лизосомальных ...):

   - 7a410-антитрипсин

   - 7a410-антихимотрипсин

   4-0 7a420-антиплазмин

   - кофактор II гепарина

   - ингибитор активатора плазминогена

   - антитромбин-III

   - 7a622-Макроглобулин

   М. 725 кД; состоит из двух идентичных /?/ субъединиц (по др.

данным - 10 субъединиц). Содержание - 2-4 г/л. /6224/ Ингибиру-

ет плазмин,тромбин,  калликреин,ферменты классического пути

активации комплемента; синтезируется вне печени. 7a02-макроглобу-

лин связывает все чужеродные лектины.Рецептор-подобные молекулы

к 7a02-МГ являются рецепторными молекулами для экзотоксина Рseu-

domonas. /7546/93/

   2Альфа-1-антитрипсин0 защищает ткани легких отпротеолитичес-

кого разрушенияэластазойнейтрофилов.  Синтезируется преиму-

щественно клетками паренхимы печени. Врожденный дефицит ингиби-

тора (норма 2,4 г/л) является причиной развития эмфиземы легких

во взрослом возрасте. Недостаточность связывается с возникнове-

нием бронхиальнойастмы.Синтез  патологического Z-мутанта (в

отличие от нормального М-типа) сопровождается болезнями  печени

- от холестаза у новорожденных до цирроза печени и гепатоцеллю-

лярной карциномы у взрослых. /2372к-х/

   2Другие белки0: /7237/94/

   - СРБ (см. ниже)

   - амилоид Р (см. ниже)

   - ЛПС-связывающий белок

   5- a1-кислый гликопротеин

   5- heme oxygenase

   5- манноза-связывающий белок

   5- лейкоцитарный белок 1

   - 2Апо(а)0 обладают антиоксидантной активностью.  Концентрация

привоспалении повышается с 2 до 280 мг%.Апо(а) удаляется из

кровотока путем связывания с ГЗГ (=глюкозаминогликанами)  внек-

леточногоматрикса  стенкиартерийи последующего поглощения

макрофагами. Связываются с ЭК, лимфоцитами, фибрином, продукта-

ми деградации фибрина (пдф),фибронектином, эластином, ГЗН-ми.

Апо(а) удаляется из кровотока путем связывания с ГЗГ внеклеточ-

ного матрикса стенки артерий и последующего поглощения макрофа-

гами. /6902/

   2С-РЕАКТИВНЫЙ БЕЛОК (СРБ)0 /7483,2854,7965/

   5Открыт в 1930г. Маркер острого воспалительного процесса.

   _Биохимия

   СРБ - лектин антигалактанового типа с М. 118-144кД.

   5Семейство белков - пентраксинов. Не гликопротеид.

   Состоит из 5 (6-?) идентичных (циклических-?) субъединиц(с

М. по 21,5кД /23кД-?/),связанных нековалентно между собой. На


                            - 15 -

каждой субъединице по одному фосфохолин-связывающему  центруи

по одному ФХ-независимому центру. /7489/

   Связывает

   - полисахарид-С пневмококка,

   - фосфатидилхолин (вкапсуле  пневмококка-???)черезионы

     Са52+0.

   - Полимерная форма - п-СРБ. 4Пентамерный (нативный)0 4СРБ обла-

4дает противовоспалительным действием. /1691к/0

   - мономерная форма - м-СРБ.4Мономерный СРБ обладает провос-

4палительным действием,0

   - тафтсиноподобные пептиды - А,Б,В (по 4 аминокислотныхос-

     татка).

   5Время полужизни - 4 часа. /7490/0

   _5Синтез

   5Синтезируется лимфоцитами (моноциты не продуцируют), гепато-

5цитами в ответ на эндогенные пирогены. /7482,7485/

   5Индуцируется /7965/

   5- ИЛ-1,

   5- травмой,0 5- облучением,

   5- микроорганизмами.

   5Синтез регулируется интерлейкинами и половыми гормонами.

   Высокая концентрацияСРБ  наблюдается при кортикостероидной

терапии. /2809к/85/

   _Свойства

    1. Служит  опсонином(черезкомплемент тоже) и производит

детоксикацию организма./7491/ Повышает функциональную активность

фагоцитов.

   5Рецептор дляС-РБ имеется в основном на клетках с Fc-рецеп-

5торами (100% моноцитов, нейтрофилах /6154/, 2% Т-лимфоцитов, на

5В-лимфоцитах нет). /7487/

   Осуществляет клиренс

   - микроорганизмов,

   - "старых", поврежденных и некротических клеток и их продук-

тов,

   - связывается с ДНК, нуклеотидами,

   - липидами, ЛПНП, ЛПОНП,

   - ПС (остатками галактозы) /7488/. /7965/87/,7580/

   - фибронектином /6149/

   - лецитином,

   - сфингомиелином некротизированных тканей

   - ПС-С стрептококков,

   - холинфосфатидом,

   - лектином

   + протамины, гистоны,

   + основные белки миелина,

   + катионные белкилейкоцитов

   ──760 активация комплемента с С5- ?. /297/

    2. Комплекс   С-РБ   с   лигандом   запускает  КПКиАПК.

/7584,3169,2854;7965/ Провоспалительное действие. /1691к/

СРБ приводит  к фиксации на комплексах комплемента (С1q,С2,

С4, С3,), в результате чего общая гемолитическая активность сы-

вороткиснижается  на80%,а  компонентов С3-С9 - на 45-66%.

/1584/

   ──760 С3-зависимый фагоцитоз комплексов. /297/

   Мономерный СРБ оказывает провоспалительное действие,

   нативный пентамерный   -   противовоспалительное   действие.

/2256к/96/

   3. СРБ in vitro в концентрациях 50-250 мкг/мл обладаетвыра-

женныммитогенным действием в отношении лимфоцитов.Митогенные

свойства теряются при блокаде фосфорилхолиновых сайтов  связыва-

ния СРБ. /2274к/94/ CРБ усиливает спонтанную пролиферацию лимфо-

цитов in vivo. /2808к/96/

   4. Запускает реакцию преципитации и агглютинации; (артефакты

в реакция агглютинации с микробами)

   54. Регулирует активность лимфоцитов,моноцитов,гранулоци-

4тов, тромбоцитов и эритроцитов (всех форменных  элементовкро-

4ви)./6149/0 Стимулирует   активностьЕКК  (тормозитопухолевый

рост); стимулирует противоопухолевую активность макрофагов. /7965/

   6. СРБ является слабым хематтрактантом для нейтрофилов.Эти

свойства могут быть связаны с тафтсиноподобными пептидами,  об-

разующимися при протеолизе СРБ под действием лизосомальных фер-

ментов. /2365к/ Поглощенныыенейтрофилами СРБслудит  хемоат-

трактантом длянейтрофилови  обеспечиваетихпривлечение в

очаг.Сущность механизма проникновения нейтрофилов ввоспали-

тельныйочаг  состоитво _взаимодействии СРБ с фибронектином и

_ламинином. соединительной ткани, его накопление в очаге воспале-

нияи распаде на мономеры под действием кислотных условий оча-

га. /2365к/

   74. Ингибирует агрегацию тромбоцитов.

   Т.о., С-РБ  выполняетфункцию АТ на ранних стадиях воспали-

тельной реакции (эволюционный предшественник антител).

Сходство с антителами: 1. опсонин

                       2. активация комплемента

                       3. РА и РП

                       4. Хемотаксин

   _Содержание


                            - 16 -

   - У новорожденных - 0,1 мг/л (15-6000 мкг/л сыворотки у здо-

ровых новорожденных).Корреляция между концентрацией СРБ в сы-

воротке матери и сывороткиноворожденногоотсутствовала,что

указывает на эндогенное происхождение СРБ новорожденного. /2362к/

   4Увеличение концентрацииСРБ у новорожденных до 10 мг/л сви-

4детельствует о наличии инфекционной патологии (пневмонии,  сеп-

4сиса, бактериальной кишечной инфекции). /7486/

   - Концентрация СРБ в сыворотке здоровых детей в возрастене

изменялась. /2362к/85/ У детей в возрасте 1 месяца - 150 мкг/л,

у детей 8-12 лет - 170.

   - У взрослых - 470 (мкг/л). (др. - 3 мг/л)

   1В нормальной сыворотке этот белок не определяется 0 (содержа-

ние 10 мг/л).Во время воспаления и при деструкции тканей кон-

центрация увеличивается в 20 раз и более (до 200 мг/л =  200000

мкг/л и более); содержание СРБ отражает интенсивность патологи-

ческих процессов. Повышается с возрастом.

   При сепсисе концентрация СРБ превышает 10 мг/л. /2362к/85/

   4Предполагается, чтороль СРБ заключается не столько в выве-

4дении лиганда, сколько в изменении его распределения в организ-

4ме. /7490/

   5При гиалиновой мембранной болезни и при желтухе концентрация

5СРБ не возрастает. /2362к/

   _Определение.

   Метод кольцепреципитации.

   2АМИЛОИД Р0 - БОФ, родственный СРБ-ку. /1691к/

   4Структура. СРБ состоит из одного 5-членного кольца,сыворо-

4точный амилоид Р - из 2-х состыкованных колец.  Молекулы возни-

4кают в результате дупликации общего гена. Продуцируются гепато-

4цитами под действием ИЛ-1, ИЛ-6.0/1691к/

   _Свойства..

   - Обладает  устойчивым противовоспалительным действием.

   - При связывнии с хроматином и гистонами активируеткомпле-

мент по классическому пути.

   - Участвует в формировании фибриллярного компонентабляшек,

   - ингибирует   эластазу  (препятствуетразборкеамилоида).

/1691к/

   - опсонизатор элиминации модифицированного ЛПВП из крови.

   Уровень в  норме - 40-70 мкг/мл сыворотки,  при ревматоидном

артрите, коллагенозах,амилоидозах уровень увеличивается в 2-4

раза. /1691к/

   2VI. ИНТЕРФЕРОНЫ0 /6195/

   5(от лат.inter - между, ferens - несущий; от явления, когда

5организм или клетка,инфицированные одним вирусом, становились

5нечувствительными к заражению другим вирусом)

   ИФ открыты в 1957г. Айзексом и Линдеманном.

   Интерфероны (ИФ) - секреторные видоспецифичные белки, синте-

зируемые клетками и обладающие противовирусными и противоопухо-

левыми свойствами. ИФ - гетерогенные белки (М.20-40кД; 5альфа- и

5бета-ИФ включает 166 аминокислот,гамма - 146) гликопротеидной

5природы. Выделяются в виде предшественников. /7954/92/

   _Выделяют 3 вида ИФ:

   альфа - из культуры лейкоцитов   │ 1-ый тип

         - 5синтезируются лейкоцитами и кератиноцитами,

   бета  - из культуры фибробластов │

         5- 0синтезируются 5фибробластами,

           5кератиноцитами,

           5эпителиальными лейкоцитами /1666к/94/

   гамма - из  культуры активированных митогеном     │ 2-ой тип

           или антигеном Т-лимфоцитов (иммунный ИФ).

         4- синтезируется активированными Т-лимфоцитами и ЕКК.

           4/2461к/

           5Гамма-ИФ вырабатывается в Т-лимфоцитах-хелперахпод

           5действитем специфического антигена, растительных ми-

           5тогенов, форболовых эфиров. /7954/92/

   Концентрация в крови - 2 МЕ/мл

   1 МЕ  (международнаяединица)- количество ИФ,защищающее

культуру клеток от 1 ЦПД4500 вируса.

   У грудных детей концентрация ИФ несколько выше. /7481/

   _Синтез.

   осуществляется всемиклетками  организма (в большей степени

клетками рэс) и 1стимулируется0

   - вирусами, бактериями,эндотоксинами,

   - фрагментами собственной ДНК,(дибазолом), двунитевой РНК,

   - клетками РЭС1,

   - в  красномкостноммозге  колониестимулирующимфактором

   /КСФ/ /7954.../ Продукция ИФ инфицированными клеткамимо-

     жет  предохранять прилегающие клетки от последующего инфи-

     цирования.

   4Отмечено эволюционноеродство  альфа-2-интерферонаиаль-

4фа-1-тимозина, которыеэкскретируютсяклетками  ИС,атакже

4синаптическими мембранами клеток головного мозга. /1652к/

   4Бета-ИФ предположительноможет  являться природным антиго-

4нистом КСФФ, тормозя сверхпролиферацию гемопоэтических клеток и


                            - 17 -

4ускоряя их созревание./7954/92/

   _Рецепторы

   4Альфа и бета-ИФ имеют общий рецептор. /1666к/94/

   4Рецепторы /R/ для ИФ (гликопротеины) + ИФ 0──764 активация фосфоли-

4пазы А20──764 метаболизм арахидоновой килоты под действием эпок-

4сигеназы в эйкозаоиды, которые стимулируют образование индукто-

4ра транскрипции./7954/92/

   _2Функции

   (В основном антимикробное и иммуномодулирующее действие).

   1. _СтимулируютИС.  (повышают продуцию АТ /в избытке ИФ - по-

давляют/, В-лимфоциты).

   - Стимулирует АПК (антигенпрезентирующие клетки) и их микро-

бицидную активность.Под влияниембета-ИФ  моноциты/макрофаги

активно синтезируют ФНО_альфа,который усиливает цитотоксичес-

кие функции у моноцитов/макрофагови киллерную  активностьу

ЕКК. /2348к/

   - Стимулирует созревание В-лимфоцитов в плазматические клет-

ки /7954/92/. Усиление активации АТ-образования. /2292к/

   - Подавляет ГНТ и ГЗТ,но в момент индукции-  стимулируют

аллергию /2126к,2157к/.

- Усиление адгезии лимфоцитов на ЭК. /2272к/

   2. Ингибитор роста и пролиферации клеток /2230к/96/

   -- _1Антипролиферативноедействие.ИФ на клеточный рост0 (нор-

мальных и злокачественных клеток /2126к/) зависит,  поменьшей

мере,от  синтеза  индоламино-2,3-двуоксигеназы,  расщепляющей

триптофан,необходимый для роста клеток эукариот, в т.ч. внут-

риклеточных паразитов - простейших. /7954/92/

   - Препятствует росту 1простейших и паразитов0.

   - 1Подавление репродукции _вирусов.0 вследствии нарушения иници-

ациисинтеза  вирусных белков (иРНК не прикрепляется к рибосо-

ме). При этом функции клетки сохраняются.

   4(Торможение репликации вирусов в клетке связано синдукцией

4ИФ-ом таких ферментов,как олигонуклеотидсинтетаза /ОС/ и про-

4теинкиназа.ОС в присутствии 2-нитевой РНК синтезирует изАТФ

42'5'-адениловые олигомеры,активирующие РНКазу L,действующую

4на РНК вирусов и самой клетки. Протеинкиназа фосфорилирует аль-

4фа-субъединицуинициирующего  фактора,препятствуя трансляции

4вирусных белков. /7954/92/)

   - _Активирует 1ЕКК.0 (естественные клетки-киллеры)/7954/92/;

   - _Антибактериальное.действие (преимущественно на Г+микро-

флору): нарушаетразмножение микробов в течение 10 минут инку-

бации с бактериальной структурой. /2126к/

   - 4(Подавляет _инвазию клеток.,вызваннуюEimeria  tenellaи

4S.typhimurium,подавляет  репродукциюмалярийногоплазмодия,

4токсоплазм,риккетсий, лейшманий, трипаносом, листерий, хлами-

4дий, микобактерий и др. Повышает неспецифическую резистентность

4к инфекциям,вызванным Kl.pneumoniae,L.monocytogenesидр.

4/7073/)0

   3. Активируетфагоциты  /7680/89/.Повышает цитотоксической

активности _1макрофагов.0. Усиливает синтез Fc-рецептора /7954/92/.

   - Гамма-ИФ усиливает продукцию ФНО-альфа. /2461к/

   - Активирует  _фосфолипазуА2.с  образованиемэйкозаноидов

/6195/, стимулирует продукцию нитроксидных радикалов. /2461к/

   - Усиливает синтез и экспрессию HLA антигенов I (альфа,бе-

та-ИФ) и II (гамма-ИФ) классов /7954/92/;

   - Усиление мобилизационных реакций нейтрофилов. /2292к/

   4. Ослабление продукции ГМ-КСФ.

   5. Пирогенность (прямое действие на гипоталамус). /2292к/

   6. Синергетическиеэффекты  сФНОи  другимицитокинами.

/2292к/

   7. Усиление экспрессии адгезивных молекул на ЭКи  лейкоци-

тах. /2292к/

   8. Усиление  ЛПС-индуцированнойсекрециимакрофагами  ФНО,

ИЛ-1, ИЛ-6;   усиление   биоцидностимакрофагови  экспрессии

ФНО-рецепторов. /2292к/

   _Получение.

   ИФ видоспецифичны(ИФ  одноговидаживотных  не подавляет

размножение вирусов у другого вида животных),но не вирусоспе-

цифичны.

   3 метода получения ИФ:

   4(Из кровине получают,  так как для получения одного грамма

4ИФ из крови необходимо обработать 100 тысяч литров крови.)

   1. Химический синтез активной части молекулы;

   2. Включением гена ИФ в бактериальные клетки (Е.с.); выделя-

ют из экстракта осадка клеток Е.с.аффинной хроматографией (на

колонке с МАТ); = интерферон А. Схема получения: накопление ре-

комбинантного штамма (1-2 суток),отделение биомассы, разруше-

ние структур, ресуспендирование в буфере, ультрафильтрация, аф-

финнаяхроматография супернатанта на колонке с моноклональными

антителами,промывка колонки,срыв ИФ 2М  NaCl-?,лиофильная

сушка и стандартизация.

   3. Выделение из культуры лейкоцитов,фибробластов идругих

клеток:


                            - 18 -

   Схема получения:культуру клеток заражают одним изнепато-

генных для человека виросов (вирусы Сендай,болезни Ньюкастля,

везикулярного стоматита), через сутки центрифугируют, надосадок

очищают аффинной хроматографией, ультрафильтрация (для удаления

вирусов-?), лиофилизация, стандартизация.

   Длительное введение рекомбинантных ИФ стимулирует образова-

ние у 30%больных АТ к ИФ. Природные ИФ практически не иммуно-

генны. /7492/

   Другие противовирусные ингибиторы - липопротеиды, мукопроте-

ин (альфа), подавляющие активность вирусов полиомиелита, клеще-

вого энцефалита,миксовирусов,подавляя адсорбциювирусов  к

клетке.

   2VII. ЛИЗОЦИМ

   Открыт Флемингом в 1922г.

   _Биохимия

   Это низкомолекулярный (М.15 кД) щелочной фермент - 1мурамида-

1за0 (бета-глюкозаминидаза),гидролизирующий связь N-ацетилмура-

мовойкислоты и N-ацетилглюкозамина,содержащиеся в клеточной

стенке некоторых микроорганизмов (растворяет мукополисахариды).

/6528/89/ 4130 аминокислотных остатков.

   _Синтез

   Синтезируется фагоцитирующими клетками (моноцитами, макрофа-

гами, полиморфоядерными лейкоцитами), накапливаясь в гранулах и

лизосомах, затем поступает в плазму,синовиальныеоболочки  и

выделяется преимущественно со слюной, слезной жидкостью и моло-

ком. Высвобождение лизоцима из клеток кальций (Са52+0)-зависимо.

   _Функции

   - Лизирует многие сапрофиты, например, Micrococcus lysodeic-

ticus, и некоторые патогенные бактерии, поврежденные антителами

и/или комплементом. Значение лизоцима как микробицидного факто-

ра невелико в связи с весьма ограниченным его антибактериальным

спектром,который включает восновном  сапрофитныебактерии.

/350/84/ Антимикробное действие лизоцима распространяется глав-

ным образом на _Г+ кокки../7073/-? 4Кроме лизоцима микробицидную

4активность могут проявлять и другие гидролазы: аргиназа, глико-

4зидаза. /350/84/0 Лизоцим проникает до пептидогликанового слоя и

разрушает цитоскелетные элементы.

   5- Лизоцим у крупного рогатого скота в преджелудках и утра-

5воядных обезьянвыполняет сходные функции в ферментации расти-

5тельной пищи в ЖКТ./7959/87/

   5- Фрагмент лизоцима Thr-Leu-Lys-Arg обладает иммуномодулиру-

5ющими свойствами (предположительно)./7960/87/ Лизоцим ингиби-

5рует лимфобластогенез и пролиферацию клеток  вСКЛ./7961/86/

Лизоцим способствует репаративным процессам.  /7073/ Активирует

фагоцитоз и хемотаксис лейкоцитов. /7073/

   _Содержание

   Лизоцим содержится в слезах,крови,  бронхиальномсекрете,

молоке, курином белке и в икре разных рыб. Особенно много лизо-

цима вслюне животных (зализывание ран животными).Этим может

объясняться относительно легкая заживляемость ран и  царапинв

ротовой полости, например, после удаления зуба). /293/

   - В крови - 2 мг/л (порядка 1 мг/мл). При беременности у че-

ловека индуцируются большие количества лизоцима,  который обна-

руживается в плаценте,матке, амниотической жидкости, семенной

плазме, цервикальной слизи. /7982/85/ В женском молоке лизоцима

в 100 тысяч раз больше, чем в коровьем.

   - В слезной жидкости в 150 раз больше (устойчивость роговицы

особенно ккокковой  микрофлоре;в отношении некоторых кокков

слеза действует в разведении в 10 млн раз /293/).

   - Уровень лизоцима наиболее высок в сывороткеноворожденно-

го;держится на высоком уровне до 3 лет, затем с возрастом со-

держание падает.

   - В  куриныхяйцах(лизоцим  белка служит надежной защитой

против весьма опасной для него стафилококковой инфекции). /293/

Лизоцим полностью обусловливает бактерицидные  свойствасвежих

яиц.

   _Определение активности.имеет  определенноедиагностическое

значение при гематологических (лейкоз,гранулематоз), нефроло-

гических, инфекционнных иэндокринных/диабет/  заболеваниях.

/6528/ Вкачестве стандарта для определения количества (титра)

лизоцима в испытуемом материале служит культура микрококка (ли-

зодеинтикус). /293/

   _Антилизоцимная активностьмикробов. считается фактором пато-

генности.Высокая степень антилизоцимнойактивности  показана

для менингококков, особенно серогрупп А, В и С. /2381к/

   _Лизоцимная активность микроорганизмов

   Известно, что лизоцимная активность присуща многим бактериям

(Г- и Г+). Функция - регуляция экологии бактерий. /6339/

   Наиболеее выраженной лизоцимной активностью обладает

   - штамм синегнойной палочки (40%).

   - Патогенная  кишечнаяпалочкавыделяет  только от больных

(активность в 33%).

   - У  стафилококков внешней среды лизоцим обнаружен в 23%,а

от больных - 31%.


                            - 19 -

   - Некоторые сальмонеллы.

   2VIII. КАТИОННЫЕ БЕЛКИ

   Катионные белки (фагоцитин,лейкин и др.) содержатся в азу-

рофильных и специфических гранулах нейтрофилов и высвобождаются

как в просвет лизосом, так и внеклеточно. При активации нейтро-

филов содержание белков падает.Принезавершенном  фагоцитозе

высвобождение затормаживается. /2723к/

   _Биохимия

   4Насчитывается 7 белков,обусловливающих бактерицидное дейс-

4твие. К ним относятся альфа-,бета-,L-лизины (лизоцим, лактофер-

4рин), гистоны, протамины, щелочные полипептиды.

   4Катионные белки на 50%состоят из гидрофобных аминокислот и

4в избытке содержат аргинин и лизин. Некоторые из катионных бел-

4ковпо своему противомикробному действию напоминают полимиксин

4В и инактивируют Г- бактерии. /7664/84/

   4М. бета-лизинов - 6кД.

   _5Содержатся .влизосомах лейкоцитов (ткани почек,селезенке,

5легких, головного мозга,надпочечников) и тромбоцитов./272-39/

5Их нет в лизосомах других клеток.

   _Свойства

   - вызывают повышение проницаемости клеточной стенки бактерий

в присутствии кислорода /анаэробы устойчивы к катионным белкам/

(положительно заряженные белки сорбируются на  отрицательно-за-

ряженных поверхностях); тем самым облегчается проникновение ли-

зосомальных ферментов в цитоплазму поглощаемых частиц.

   1В настоящее время особо важное значение придается дефензинам

1- богатым   аргининомбелкам,  которыеобладаютспособностью

1встраиваться в липидный слой клетки,нарушать ее проницаемость

1и убиватьширокийспектр  бактерий,грибовидаже вирусов.

1/2291к/0 - ПОВТОР

   - или вызывают агрегацию лигандов (инактивируя т.о. микроор-

ганизмы)./272/

   - Щелочные полипептиды эозинофилов участвуют в лизисепара-

зитов. /7073/

   - Лактоферрин связывает железо и оказывает бактериостатичес-

кое действие (цитохромы).

   Инактивируют Г- микроорганизмы ( и некоторыеГ+,например,

бациллы), отчастикандиды./272-37/ Катионные белки высокоак-

тивны против кандид и Г+бактерий,в  товремякак  Е.с.и

Salm.typhimuium более устойчивы к их действию. /350/84/

   Катионные белки альвеолярных макрофагов высокоактивны против

кандид и Г+ бактерий - Г+ бацилл и др.(Г- кишечная палочкаи

сальмонеллы устойчивы к их действию).

   _Синтез

   Основными продуцентами бета-лизинов служат тромбоциты,сте-

пень разрушения которых присвертываниикрови  коррелируетс

возрастанием уровня бета-лизинов.

      2IX. NO5-0 (окисел азота)

   Высвобождение оксида азота (NO) из лейкоцитов,эндотелиаль-

ных, тучных клеток, нервных окончаний оказывает мощное

   - микробицидное,

   - цитоцидное,

   - противовоспалительное,

   - противоишемическое,

   - противотромботическое,

   - цитопротективное действие. /2734к/

   Слюной поддерживается нормальный уровень генерации NO в тка-

нях полости рта. /2734к/

   5Синтез происходиттолько в присутствии L-аргинина,который

5является   исходным   продуктом,   подвергающимся   воздействию

5NO--cинтетазы. NO- является промежуточным продуктом превращения

5L-аргинина,окончательный же продукт - NO425, по уровню которого

5в моче или культуральной жидкости можно судить об интенсивности

5синтеза. /2294к/

   Синтез индуцируется ФНО, ИЛ-1 и др. /2372к-х/

   Альфа-ФНО  активируетNO-синтетазу,вызывающей образование

NO-реактивныхметаболитов.  ИЛ-10   ингибирует   NO-синтетазу.

/2294к/95/ Путигенерации окиси азота и супероксиданиона в фа-

гоцитах конкурентны: продукция окиси азота (опухольинфильтриру-

ющими макрофагами)сопровождаетсяуменьшением продукции супе-

роксиданиона (в перитонеальных макрофагах наоборот). /2445к/98/

   Высокая активность нитрооксид(NO)cинтетазы обнаружена в ней-

ронах. ОбильнуюNO-ергическуюиннервацию  получаютартериолы

подслизистой основы и слизистой оболочки пищевода.

   NO-синтетаза, как фермент энергетического обмена, появляется

у анаэробных организмов в докислородную эру жизни. Затем форми-

руется холинергическая передача. У аэробов NO-ергическая иннер-

вация выполняетфункцию или медиатора,или модулятора нервных

импульсов внейронах,  историческиболеестарых   генераций.

/2306к/98/


                            - 20 -

   NO, образуемый из L-аргинина специфической синтетазой в ней-

ронах и ЭК,участвует в нейротрансмиссии и вазодилатации, пре-

пятстсвует адгезии и агрегации тромбоцитов. Гиперпродукция NO в

самых различных тканях в условиях септического  шока,обуслов-

ленного Г-флорой,  сопровождаетсяусиленным лизисом бактерий

активированными макрофагами,падением артериального давления и

угнетением функциональнойактивностимиокарда  - характерными

проявлениями гиподинамической стадии септического шока./2372к-х/

   NO также является одним из медиаторов в развитии респиратор-

ного дистресс-синдрома взрослых.В результате реакции между NO

и супероксидныманион-радикалом образуется пероксинитрит,вы-

полняющий роль цитокина при различных патологических  процессах

и болезнях._Ингибиторы NO. оказались эффективными в лечении эн-

дотоксемии ипредупреждении при этом расстройств гемодинамики,

но усиливают повреждение печени.С другой стороны,NO образует

комплексс  гемовым железом цитохрома Р-45- и инактивирует этот

ключевой фермент монооксигеназной системы печени,  объясняя рез-

коеуменьшение содержания цитохрома Р-450 в печени крыс в усло-

виях экспериментальной эндотоксемии. /2372к-х/

      2X. ЛЕКТИНЫ

   Это белки,  способныесвязываться с определенными моносаха-

ридными звеньями в полисахаридах и гликопротеидах (т.е. это уг-

леводсвязывающие белки).

   4[Связывание обратимое и необратимое.]

   4Термин введенБойдом  (W.C.Вoyd)в 1954 году.В последнее

4время предполагается терминаффинитины.Развивается  наука-

4лектинология.

   _Биохимия

   По природе лектины являются гликопротеинами;в качестве не-

белковой компоненты содержат углеводы (3-80%,в среднем 3-10%)

4и ионы металлов (ионы кальция, марганца, в небольшом количестве

4ионы цинка,магния и пр.). [Исключение - конконавалин А и лек-

4тин горохане содержат углеводов.] Удаление металлов сопровож-

4дается потерей биологической активности,после удаленияугле-

4водной компоненты активность сохраняется.

   Лектины -  многовалентные лиганды с 2-4 центрами связывания.

──760 Склеивание клеток.

   _Функции

   1. Связывают  иудаляют(эндоцитоз) из кровотока следующие

частицы (вирусы,токсины микробов, иммунные комплексы, образо-

ванныеиммуноглобулинамиА и G,  факторы роста,трансферрин,

транскобаламин, ЛПНП;

   1Рецепторы лектинового типа0 имеются на фагоцитах клеток пече-

ни и селезенки. Маннозо-6-фосфатные рецепторы принимают участие

в сортировке лизосомальных ферментов.

   2. 1Рецепторык лектинам0 имеются на Т-лимфоцитах (экспрессия

увеличивается под действием гормонов тимусаинейраминидазы),

стимулируют   хоминг  предшественников  Т-лимфоцитоввтимус.

/7507/

   3. Лектины и лектиновые рецепторы ИКК участвуют в формирова-

нии аллергической реактивности. Показано, что образование комп-

лексалектин-лектиновыерецепторы  наповерхностной мембране

лимфоцитов может блокировать АГ-связывающие  рецепторыпослед-

них.

   4. Cпособны вызвать агглютинацию клеток (агглютинация эритро-

цитов рицином вызывает мгновенную смерть) или их  митоген-

ую стимуляцию (что используется в серологиии)

     Например,1 0Соn A - конконавалин А (из семян Сanavalin ensi-

                       fermis) - митоген для Т-супрессоров,

               лектинлаконоса - митоген для Т- и В-лимфоцитов

                       (стимулирует ответ В-лимфоцитов на тимус-

                       зависимый антиген);

               джекалин выделен из экстракта хлебного дерева;

                       - митоген для Т-хелперов (CD4+);активатор

           В-лимфоцитов;избирательно связывает

                       только Ig A (используетсядля аффинной

                       хроматографии);/7493/90/

                фитогемагглютинин (ФГА)-митоген для Т-супрессоров;

                       получают из экстракта Phaseolus (vulgaris

                       или communis);

                лектин Helix pomatia связывается с АГ А эритро-

                       цитов, и преимущественно с Т-лимфоцитами

                клещевины (рицин) - агглютинирует эритроциты,

   54. Некторые лектины активируют КПК в сыворотке человека.

   6. Обеспечение специфических межмолекулярныхимежклеточных

взаимодействий (особенно у растений);

   7. Транспорт и накопление углеводов1.

   84. Лектин гороха (связывает БОФ - альфа-1-антитрипсин,церу-

4лоплазмин, гаптоглобин, гемопексин), иммуноглобулины М,G,А;

   Все чужеродные лектины связывает альфа-2-макроглобулин.

   6Примеры0.

   4В основномэто растительные белки,тем не менее лектинопо-


                          - 21 -

4добные белки обнаружены и среди животныхимикробов.

   Лектины человека.

   4Лектиноподобными белкамичеловека являются С-РБ,субкомпо-

4нент С1q комплемента, СR3 (рецептор для фрагментов С3 компонен-

4та комплемента - С3d и ?);тромбоспондин тромбоцитов, фактор

4VIII/фактор Виллебранда, лектины и лектиновые рецепторы на мак-

4рофагах печени и селезенки.

   6Растительного происхождения:

   4Лектины найдены у более чем 800 видах растений (особенно се-

4мейства бобовых).

   4Лектинами высших растений являются

4- Соn A,G (выделен из семян Сanavalin ensifermis)-митоген

4для Т-супрессоров, [удлиняет протромбиновое время; связывает-

4ся с D-маннозой; 4-валентный тетрамер];

4- лектинлаконоса - митоген для Т- и В-лимфоцитов (стимулирует

4ответ В-лимфоцитов на тимусзависимый антиген);

4- джекалин - митоген для Т-хелперов (CD4+);  активатор В-лимфо-

4цитов;  избирательно связывает только Ig A (используетсядля

4аффинной хроматографии);выделен из экстракта хлебного дере-

4ва. /7493/90/

4- фитогемагглютинин-митоген для Т-супрессоров;получают из

4экстракта Phaseolus (vulgarisили communis);

4- клещевины (рицин),

4- семян чечевицы, эспарцета, лектин конских бобов,

4- лектин гороха (связывает БОФ - альфа-1-антитрипсин,  церулоп-

4лазмин, гаптоглобин, гемопексин), иммуноглобулины М,G,А;

4- агглютинин из зерен пшеницы  (удлиняетпротромбиновоевремя

4(связывает факторы IX, X, и II);

4- лектины хлебного дерева,

4- семян сои,

4- корней ячменя,

4и др. /7171/94/

   6Микробного происхождения:

   4Лектинами являются белок gp120 вируса иммунодефицита челове-

4ка, коклюшный токсин,дифтерийный токсин, молекулы адгезии ки-

4шечной палочки,энтеротоксин кишечной палочки,пилин гонокок-

4ков, токсин шигеллы дизентерия,холерный токсин,гемагглютиJ.

4pseudotuberculosis, адгезин дизентерийной амебы. /7171/94/ Лек-

4тины грибов и дрожжей.

   6Животного происхождения:

   4Лектины выделеныиз морских беспозвоночных (м.ежей,губок,

4м.желудя,японского краба),насекомых (таракана, мясной мухи,

4угря,корюшки),  земноводных (икры лягушки-быка и других лягу-

4шек),пресмыкающихся (яда змей),птиц (кожи эмбрионов,белок

4хряща,лектин печени),млекопитающих (лектин сердца,легких,

4нейроглии спинногомозга,лизосомальные  рецепторы,молекулы

4фибробластов, естественных клеток-киллеров, эндотелиальных кле-

4ток - тромбомодулин, клеток гепатомы, тромбоцитов; ИЛ-2, рецеп-

4тор для IgЕ лимфоцитов, гликопротеин, связывающий вирус иммуно-

4дефицита человека, рецепторы плаценты, макрофагов, купферовских

4клеток,лектин семенной жидкости, киллерных клеток, протеогли-

4каны хрящей, альфа-амилаза и Са-связывающий белок поджелудочной

4железы и др. . /7171/94/

   4Колектины - гуморальные лектины, находящиеся у млекопитающих

4и птиц.Это олигомеры,состоящие из трех полипептидных цепей,

4включающие коллагеновый и С-терминальный лектиновый домен. Лек-

4тиновые домены связывают карбогидраты микробов,  в то время как

4коллагеновый участок представляетлигандыдля  коллектинового

4рецептора на фагоцитах. Колектиновым рецептором является рецеп-

4тор для субкомпонента С1q. /7234/94/