Синтез и противомикробная активность гидразонов акридона

	Загрузить архив:
	Файл: ref-26026.zip (253kb [zip], Скачиваний: 77) скачать

Введение. PAGEREF _Toc167886829 h 4

1.... Производные аминоакридина: получение и противомикробная активность (обзор литературы) PAGEREF _Toc167886830 h 5

1.1   Исходные акридинилирующие агенты и акридон. PAGEREF _Toc167886831 h 5

1.2   Методы получения гидразиноакридинов. PAGEREF _Toc167886832 h 8

1.3   Антибактериальная активность производных акридина. PAGEREF _Toc167886833 h 11

1.4   Биологическая активность гидразонов акридона. PAGEREF _Toc167886834 h 12

2.... Обсуждение результатов. PAGEREF _Toc167886835 h 14

2.1   Синтез исходных акридона, 9-хлоракридина и 9-метоксиакридина. PAGEREF _Toc167886836 h 15

2.2   Синтез исходных гидразидов N,N-диалкилированого глицина. PAGEREF _Toc167886837 h 17

2.3   Синтез исходных гидразидов N,N-диалкилированой ГАМК.. PAGEREF _Toc167886838 h 18

2.4   Синтез гидразонов акридона. PAGEREF _Toc167886839 h 20

2.5   Изучение противобактериальной активности гидразонов акридона. PAGEREF _Toc167886840 h 24

3.... Экспериментальная часть. PAGEREF _Toc167886841 h 27

3.1   Химическая экспериментальная часть. PAGEREF _Toc167886842 h 27

3.2   Биологическая экспериментальная часть. PAGEREF _Toc167886843 h 29

Выводы.. PAGEREF _Toc167886844 h 30

Литература. PAGEREF _Toc167886845 h 31

[1]] (рис.1.1).

[2]]. Для получения акридонов, не cодержащих амино- и гидрокcильных групп (1.2, где R¹NH2, OH), раcпроcтраненной являетcя циклизация cоот­вет­cтвующих N-фенилантраниловых киcлот 1.5 cерной киcлотой [[3]]. Для акридонов, содержащих амино- и оксигруппы удобным cпоcобом полу­че­ния являетcя изомеризация 3-фенилантранилов 1.3 в уcловиях киcлотного катализа [[4], [5]] или окиcление cоответcтвующих 2-аминобензофенонов 1.6 [[6]] (рис. 1.2) 1.1 [7], [8]] описан способ получения 9-хлоракридина 1.7, в ос­но­ве которого лежит циклизация N-фенилантраниловой кислоты 1.5 под действием 8-крат­ного избытка хлорокиси фосфора при кипячении. 1.5 [9]], что умень­ше­ние избытка хлорокиси фосфора из 8 до 1.5-кратного (от расчетного) с разбав­ле­ни­ем реакционной среды хлороформом снижает опасность проведения синтеза и тру­до­емкость стадии нейтрализации, но не уменьшает количество образующихся в результате реакции смолистых примесей. 1.1.3 9-Метоксиакридин 9-Метоксиакридин 1.8 является удобным реагентом при получении произ­вод­ных 9-аминоакридина в мягких условиях [[10]]. От 9-хлоракридина 1.7, применяемого в тех же целях, его выгодно отличают стабильность при хранении и отсутствие по­бочных веществ кислого характера при акридинилировании оснований ами­но­ком­понентов. Основным методом получения 1.8 является обработка 1.7 метилатом натрия в кипящем метаноле (рис. 1.4). Выходы при этом составляют 85 – 90% [[11]]. С другой стороны, было показано, что абсолютная среда не является обязательной для успешного проведения реакции. 9-Метоксиакридин образуется и в присутствии в качестве основания гидроксида натрия вместо метилата. В этом случае следует считаться с возможностью гидролиза как 9-хлоракридина, так и продукта реакции до акридона, однако скорость этого гидролиза, по-видимому, невелика. При ограниченном времени проведения реакции удается достичь выходов на уровне 65 – 70 %. 1.7 [12] – ,[13],[14],[15],[16],[17]]. Несмотря на обратимость реакции и, следовательно, целесообразность введения одного из реагентов в избытке (для смещения равновесия), в большинстве случаев синтезы ведут при соотношении реагентов близких к эквивалентному. Количество фенола (с учетом его небольшой молекулярной массы) может быть небольшим. В большинстве случаев оно определяется растворимостью реагентов в феноле в выбранных экспериментальных условиях. В большинстве случаев реакцию по умолчанию проводят при 110 – 120 oC, од­нако этот температурный диапазон не является строго обязательным. По-види­мому, реакция не менее успешно может протекать и при меньших температурах. Так, при акридинилировании гидразидов аминокислот действием 2-метокси-6,9-дихлоракридина применялся следующий температурный режим: 40 мин при 100 oC и 150 мин. при 60 – 80 oC [[18]]. Одновременно, в работе [[19]], что реакция акридинилирования идет в условиях общего кислотного катализа. Именно этим соображением и обуславливают выбор фенола в качестве растворителя. С другой стороны, показано, что при реакции 9-хлоракридина с избытком первичного амина в отсутствии растворителя (т.е в среде, которую следует считать основной) продукты образуются в мягких условиях, быстро и с хорошими выходами [9]. Таким образом целесообразность кислотного катализа и использования фенола в качестве растворителя весьма сомнительна. Основной проблемой при выделении продуктов акридинилирования является отделение остатков фенола и продуктов его окисления и, с другой стороны, отде­ление побочного продукта – акридона. Если от основной массы фенола удается из­бавиться отмыванием продукта раствором щелочи (при выделении продукта ак­ридинилирования в виде основания) или диэтиловым эфиром (при выделении в ви­де гидрохлорида), то удаление остаточных количеств 1.2 представляет значите­льную проблему. Так, после двух последовательных операций (осаждение основания из водного раствора 1 M раствором NaOH, фильтрование и промывка основания на фильтре водой, перевод полученного основания в гидрохлорид) в продукте все еще оставался фенол на уровне 0.01 – 0.05 % [9]. Удаление акридона является еще более сложной задачей из-за крайне низкой растворимости акридона в большинстве органических растворителей. Так, во всех образцах гидразиноакридинов, полученных из 9-хлоракридина и оснований гидразинов методом полуколичественной ТСХ в присутсвии свидетеля обнаружен акридон на уровне не менее 0.01 %. В о[20]], акридиниламиноспиртов [[21]], анилинов [[22]], гидразинов [[23]] и гидразидов феноксикарбоновых [[24]] и аминокислот [[25]]. Не рассматривая подробно эти работы отметим лишь основные результаты.[26]], где автором отмечается высокая перспективность акридинов и их амино­про­из­водных в качестве противомикробных агентов при применении invivoи invitro, в качестве антисептических агентов и фунгицидов. Так, производные 9-аминоакридина 1.9 запатентованы [[27]] в качестве антисептических средств. Облучение светом в ряде случаев повышает про­ти­во­бак­териальную активность этих производных [[28]], что дополнительно указывает на опосредование противобактериального действия нуклеиновыми кислотами. В ряде случаев показано ингибирующее действие аминоакридинов на размножение микобактерий [[29]]. R' =H, CH3CO; R'' = H, CH3CO; R''' = CnH2n+1, CnH2n (n=1...10) [30] – , [31], [32], [33]] показана активность ряда нитропроизводных 9-ами­ноакридина 1.10, зависящая в большей степени от характера и положения за­мес­тителей Rи R', чем от положения нитрогруппы. Бис-акридины при слабом мутагенном эффекте (< 1% относи­тельно 9-аминокридина или 38.5 мут.кол./мкМ/чашку) являются сильными инги­би­торами роста Salmonellatyphimurium (0.17 – 1.84 мкМ / чашку – 50%) [[34]]. Однозначная корреляция противомикробной активности с интеркалирующей способностью и способностью ингибировать транскрипцию была показана для серии производных акридинона [[35]]. Кроме того, показано [[36]] сильное потенциирование мало­активными (при индивидуальном применении) акридинами действия сульфаниламидных препаратов. И, наконец, вышедший в 2001 г подробный обзор по антибактериальной активности производных акридина [[37]] показывает, что эти объекты не теряют своей актуальности и работа в этом направлении продолжается. [38]]. 10-[2-(Диэтиламино)этил]-акридин-9-он-(тиазолидин)гидразон 1.11 проя­ви­л выраженную активность (p.o) относительно Shistosomamansoni, причем трех­крат­ное применение препарата в дозе 20 мг/кг через 12 недель после инфици­ро­ва­ния мышей приводило к полному исчезновению всех форм паразита в орга­низ­ме животных [[39]]. [40], [41]] и при ран­нем применении препарата, – в течение 24 ч после инфицирования (100 мг/кг) и через 7 суток после инфицирования (25 мг/кг) [[42]]. При этом препарат, как и ряд его аналогов оказался малотоксичным [[43]]. Активность препарата обусловлена из­би­рательным ингибированием экспрессии генов паразита [[44]]. В серии ана­ло­гов 1.11 по крайней мере 4 вещества проявили высокую шистосомоцидную ак­тив­ность, ингибируя развития паразита у инфицированных обезьян даже в кон­цен­трациях 12.5 мг/кг; побочные эффекты при этом практически отсутствовали [[45]]. Фунгицидная активность производных акридина убедительно проде­монст­ри­ро­вана серией работ индийских исследователей [12 – 17], причем наибольшую активность проявили гидразинсодержащие производные 1.12. [46]]. [47]] было установлено существование таутомерного равновесия и показано, что соединения 1.14 в виде оснований предпочтительно находятся в “акридоновой” форме 1.14Б. 1.14 А 1.14 Б Было обнаружено, что соединения REF _Ref167716185 h 1.14 являются интеркаляторами ДНК средней силы и эффективно ингибируют матричные функции ДНК в условиях ПЦР [25], являются эффективными противовирусными [[48]] и интерферониндуцирующими агентами [46]. В связи с этим, в рамках рабочей гипотезы о потенциальной актив­ности интеркаляторов относительно любых объектов – носителей доступной ДНК, было выдвинуто предположение о наличии у соединений 2.1 – REF _Ref167872078 h 2.9противо­бакте­риальной активности. 2.1 – REF _Ref167872078 h 2.9 где NR2 = n = 1 [49], стр. 18], причем выход акридона составляет 90 – 95% (рис. 2.1). Следует отметить, что, независимо от степени чистоты N-фенил­антра­ни­ло­вой кислоты, 1.2 получается хроматографически чистым непо­средственно из синтеза и последующая трансформация 1.2 в 1.7 про­ходит без образования побочных продуктов. В то же время при получении 1.7 из 1.5 качест­во исходного весьма сильно влияет на коли­чество смолистых примесей в продукте. 1.5 1.2 1.7 Рисунок [1] Основным показателем противобактериальной активности препаратов была бактериостатическое действие относительно Staphylococcusaureus 209p. Известно, что штамм Staphylococcusaureus 209pчувствителен к антибиотикам (пенициллина, стрептомицина, биомицина, окситетрациклина, полимиксина).Кроме того, в литературе имеются данные,согласно которых такое производное акридина как [50]]. [2] Изучение противомикробной активности осуществляли в жидкой питательной среде методом посева на агар. Исследования проводили с использованием Staphylococcusaureus (штамм 209 p) при нагрузке 1 ´ 105 кл/мл. Готовили серию двукратных разведений препарата в питательной средетаким образом, чтобы получить растворы с концентрациями 50, 25, 12.5, 6.25и3.125 мкг/мл.В каждую пробирку с 2 мл среды мясо-пептонного бульона (МПБ) вносили 0.9 мл раствора препарата и 0.1мл суспензии микроорганизмов. Пробирки инкубировали в термостате на протяжении 24 ч при тем­пературе 37 оС. При визуальном просмотре пробирок отбирались пробирки, в которых среда была прозрачной, т.е. размножение микроорганизмов было задержано. Наименьшая концентрация препарата, которая обеспечивала задержку роста считалась за бактериостатическую. За бактерицидную считалась минимальная концентрация препарата, которая обеспечивала отсутствие колоний в чашках с мясо-пептонным агаромпосле посева на них материала с пробирок с прозрачной средой и инкубировании при 37 oС в течение 5 суток. Все эксперименты проводили в трехкратном повторении. [1]Противомикробная активность была изучена сотрудником Киевского института микробиологии и вирусологии им. Д.К. Заболотного к.б.н. Тимошок Н.М. [2]Противомикробная активность была изучена сотрудником Киевского института микробиологии и вирусологии им. Д.К. Заболотного к.б.н. Тимошок Н.М. [1].      Lehmstedt A. Über ms-Acridin-Derivate (II). VI. Mitteil. über Acridin //Berichte. – 1931. – Vol. 64, № 6. – P.1232 – 1239. [2].      Lehmstedt K., Klee H. Über das Acridol und die Tautomerie N-Oxy-acridon - 9-Oxy-acridin-N-oxyd. (XIII. Mitteil. Über Acridin) und IV. Mitteil, Über ms-Acridin-Derivate //Berichte. – 1936. – Vol. 69, № 5 – P.1155 – 1158. [3].      Jourdan F. Neue Synthesen von Derivaten des Hydroacridins und Acridins //Berichte. – 1885. – Vol. 18, № 1. – P.1444 – 1456. [4].      Lehmstedt K. Eine einfache Synthese des Acridons und 3-substituierter Acridone (IX. Mitteil. Über Acridin) //Berichte. – 1932. – Vol. 65, № 5 – P.834 – 839. [5].      Lehmstedt K. Der wahre Verlauf der Synthese von 3-Nitro-acridonen nach I. Tanasescu (X. Mitteil. Über Acridin) //Berichte. – 1932. – Vol. 65, № 6 – P. 999 – 1005. [6].      Bowen J., Gupta P., Kahu N., Lewis J. // J. Chem. Soc., Perkin Trans. – 1972. – P.2524. [7]       Skonieczny S. A review on the synthesis of the 9-substituted acridines (1970-1976) // Hete­ro­cycles. – 1977. – Vol. 6, № 7. – P. 987 – 1060. [8]       Методы получения химических реактивов и препаратов. – М.: ИРЕА, 1974. – Вып. 26. – С. 24 – 25. [9]       Сувейздис Я.И. Синтез, свойства и биологическая активность амино­акри­ди­нов / Автореферат дисс. … к.х.н., Одесса, 1996. [10]     MoloneyG.P., KellyD.P., MackP. Synthesisofacridine-basedDNAbis-intercalatingagents // Molecules. – 2001. – Vol. 6. – P. 230 – 243. [11]     Albert A. The acridines. Their preparation, physical, chemical, and biological properties and uses // London: "Arnold" .– 1966 .– 655 p[12]     Sharma R.S., Bahel S.C. Synthesis of N-acridin-5-yl-N’-aroyl(aryloxyacetyl)­hyd­ra­zines as a possible fungicides // Bokin Bobai. – 1982. – Vol. 10, № 3. – P. 111 – 114. [13]     Pathak P.B., Bahel S.C. Synthesis and fungicidal activity of N-acridin-5-yl-N’-aroyl(aryloxyace­tyl)­hydrazines // Bokin Bobai. – 1980. – Vol. 8, № 6. – P. 247 – 250. [14]     Mishra V.K., Bahel S.C. Synthesis of some fungicidal N-acridin-5-yl-N’-(a-aryl­oxy­­pro­pi­onyl)­hydrazines // Bokin Bobai. – 1983. – Vol. 11, № 3. – P. 103 – 105. [15]     Mishra V.K., Bahel S.C. Synthesis of thiazolyl compounds as potential fungicides // J. Indian Chem. Soc.– 1984. – Vol. 61, № 10. – P. 916 – 918. [16]     Srivastava S.K., Pathak R.B., Bahel S.C. Synthesis of some N-acridin-9-yl-N’-a-aryl­oxypropi­onyl­hydrazines as potential fungicides // Indian J. Pharm. Sci. – 1991. – Vol. 53. – P. 237 – 239. [17]     Srivastava S.K., Pathak R.B., Bahel S.C. Synthesis of anti fungal N-acridin-5-yl-N’-a-aryloxy­butanoylhydrazines // J. Indian Chem. Soc. – 1985. – Vol. 62. – P. 486 – 487. [18]     Шибнев В.А., Финогенова М.П., Гринберг Л.Н., Аллахвердиев А.М. Синтез акридиновых производных гидразидов аминокислот и их антималярийная активность // Биоорг. Хим. .– 1988 .– Т. 14, №.11 .– С. 1565 – 1569. [19]     Sinha B.K., Cysyk R.L., Millar D.B., Chignell C.F.. Synthesis and biological properties of some spin-labeled 9-aminoacridines // J Med Chem .– 1976. – Vol. 19, № 8 .– P. 994 – 998 [20]     Lyakhov S.A., Suveyzdis Ya.I., Bykhovskaya O.V., Isko N.M., Litvinova L.A. Biological active acridine derivatives. Part 3: Acridinylaminoacids and their esters: synthesis and cytostatic activity // Die Pharmazie. – 1997. – Vol. 52, № 7. – P. 560 – 561 [21]    Lyakhov S.A., Suveyzdis Y.I., Berezina L.K., Andronati S.A., Lvov D.K., Litvinova L.A., Denisenko R.V. Biological active acridine derivatives. 2. Chiral 9-aminoacridines // Die Pharmazie. – 1994. – Vol. 49, № 12. – P. 926 – 927 [22]     Ляхов С.А., Сувейздис Я.І., Кривцанова НМ, Хоменко О.А., Литвинова Л.О., Андронаті С.А. Синтез і цитостатична активність деяких аніліно­акри­динів // Фарм. журн. – 2000. – № 2. – C. 61 – 64 [23]     Ляхов С.А., Ляхова О.А., Мазепа О.В., Литвинова Л.О., Грень А.І. Синтез та ци­то­ток­сич­ність акридиніл-арилгідразонів // ФАР. – 2002. – №1 (33). – С. 30 – 34. [24]    Ляхов С.А., Ляхова Е.А., Панченко Н.Н., Литвинова Л.А., Андронати С.А. Син­тез и про­ти­вовирусная активность новых производных бис-акридинил­гид­­ра­зидов арилоксиуксусных кислот // Хим.-фарм. журн. – 2001. – Т. 35, № 12. – С. 10 – 13 [25]     Ляхова Е.А., Ляхов С.А., Литвинова Л.А., Топилова З.М., Вельчева И.В., Грень А.И., Лебедюк М.Н., Федчук В.П., Хорохорина Г.А. Син­тез­ и ДНК-свя­зывающие свойст­ва акридинилгидразидов N,N-диалки­ли­ро­ван­ных про­из­водных глицина // Хим.-фарм. журн. – 2003. – Т. 37, № 4. – С. 16 – 21. [26]     Dean A.C.R. Antibacterial action of acridines // Chem. Heterocycl. Compounds. – 1973. – Vol. 9. – P. 789 – 813. [27]     Пат. DD 212038 Германии, МКИ C 07 D 219/10. Acylated 2-alkoxy-6,9-diaminoacridine derivatives with antiseptic properties / H. Boehland (Германия), R. Muller (Германия), I. Loehrisch (Германия). Опубл. 21.07.1909. [28]     Wainwright M., Phoenix D.A., Marland J., Wareing D.R., Bolton F.J. In vitro photobactericidal activity of aminoacridines  // J. Antimicrob. Chemother. – 1997. – Vol. 40, № 4. – P. 587 – 589. [29]     Abadi A.H., El-Subbagh H.I., Al-Khamees H.A. Synthesis, antitumor and antitubercular evaluation of certain new xanthenone and acridinone analogs // Arzneimittelforschung. – 1999. – Vol. 49, № 3. – P. 259 – 266. [30]     Исаев С.Г., Дроговоз С.М., Шульга И.С., Сарбаш Т.Ф., Жиляева Г.М. Силае­ва Л.Ф. Биологическая активность нитропроизводных акридина // Фарм. Журн. – 1990. – № 2. – С. 41 – 44. [31]     Шульга И.С., Сухомлинов А.К., Гончаров А.И., Дикая Е.М. Синтез и анти­мик­робная активность некоторых производных 5-нитроакридина // Хим.-фарм. Журн. – 1974. – Т. 8, № 10. – С. 6 – 9. [32]     Шульга И.С., Сухомлинов А.К., Гончаров А.И., Дикая Е.М. Синтез и антимикробные свойства некоторых производных 1-нитро-9-аминоак­риди­на // Хим.-фарм. Журн. – 1974. – Т.8, № 4. – С. 16 – 18. [33]     Гайдукевич А.Е., Сухомлинов А.К., Гончаров А.И., Сашко Т.С. Синтез и противомикробная активность производных 6-нитро-9-аминоакридина // Хим.-фарм. Журн. – 1971. – Т.6, № 1. – С. 29 – 32. [34]     Ferguson L.R., Turner P.M., Denny W.A. The mutagenic effects of diacridines and diqui­nolines in microbial systems // Mutat. Res. – 1990. – Vol. 232. – P. 337 – 343. [35]     Cremieux A., Chevalier J., Sharples D., Berny H., Galy A.M., Brouant P., Galy J.P., Barbe J. Antimicrobial activity of 9-oxo and 9-thio acridines: correlation with interacalation into DNA and effects on macromolecular biosynthesis // Res. Microbiol. – 1995. – Vol. 146, № 1. – P. 73 – 83. [36]     Tawil G.G., Youself R.T. Bacteriostatic and bactericidal activities of acryflavine-antibiotic combinations // Sci. Pharm. – 1986. – Vol. 54, №1. – P. 19 – 22. [37]     Wainwright M. Acridine – a neglected antibacterial chromophore (Review) // J. Antimicrob. Chemotherapy. – 2001. – Vol. 47. – P. 1 – 13. [38]     Пат. 4711889 США, МКИ A 61 K 031/47; C 07 D 219/10. Schistosomicidal acridanone hydrazones / U. Brombacher (США), H. Link (США), M. Montavon (США). № 887580; Заявл. 18.07.86; Опубл. 08.12.87;НКИ 514/297. [39]     [207-001762] Metwally A., Abdel Hadi A., Mikhail E.G., Abou Shadi O., Sabry H., El-Nahal H. Study of the efficacy of the new antischistosomal drug 10-[2-(diethylamino)­ethyl]-9-acridanone-(thiazolidin-2-ylidene) hydrazone against an Egyptian strain of S. mansoni in mice // Arzneimittelforschung. – 1997. – Vol. 47, № 8. – P. 975 – 979. [40]     [207-000589] Sulaiman S.M., Ali H.M., Homeida M.M., Bennett J.L. Efficacy of a new Hoffmann-La Roche compound (Ro 15-5458) against Schistosoma mansoni (Gezira strain, Sudan) in vervet monkeys (Cercopithecus aethiops) // Trop. Med. Parasitol. – 1989. – Vol. 40, № 3. – P. 335 – 336. [41]     [207-000504] Sturrock R.F., Bain J., Webbe G., Doenhoff M.J., Stohler H. Parasitological evaluation of curative and subcurative doses of 9-acridanone-hydrazone drugs against Schistosoma mansoni in baboons, and observations on changes in serum levels of anti-egg antibodies detected by ELISA // Trans. R. Soc. Trop. Med. Hyg. – 1987. – Vol. 81, № 2. – P. 188 – 192. [42]     [207-001646] Pereira L.H., Coelho P.M., Costa J.O., de Mello R.T. Activity of 9-acridanone-hydrazone drugs detected at the pre-postural phase, in the experimental schistosomiasis mansoni // Mem. Inst. Oswaldo Cruz. – 1995. – Vol. 90, № 3. – P. 425 – 428. [43]     [207-001659] Coelho P.M., Pereira L.H., de Mello R.T. Antischistosomal activity of acridanone-hydrazones in Cebus monkeys experimentally infected with the SJ strain of Schistosoma mansoni // Rev. Soc. Bras. Med. Trop. – 1995. – Vol. 28, № 3. – P. 179 – 183. [44]     [207-000673] Eshete F., Bennett J.L. The schistosomicidal compound Ro 15-5458 causes a reduction in the RNA content of Schistosoma mansoni // Mol. Biochem. Parasitol. – 1991. – Vol. 45, № 1. – P. 1 – 8. [45]     [207-000680] Coelho P.M., Pereira L.H. Schistosoma mansoni: preclinical studies with 9-acri­da­no­ne-hydrazones in Cebus monkeys experimentally infected // Rev. Inst. Med. Trop. SaoPaulo. – 1991. – Vol. 33, № 1. – P. 50 – 57. [46]     Пат. 65845 А України, МПК 7 С 07 D 213/00, С 07 C 209/00. Похідні акриди­ніл-9-гідразиду амінооцтової кислоти як індуктори інтерферону / С.А. Ляхов (Україна), О.А. Ля­хо­­ва (Україна), Л.О. Литви­но­ва (Україна), С.А. Андронаті (Україна), С.Л. Рибалко (Україна), С.Т. Дядюн (Україна) та Г.І. Фортунський (Україна). – № 2003065362; Заявл. 10.06.2003; Опубл. 15.04.2004. Бюл. №4. – 4 с [207-000680]. [47]     Дизайн синтез та зв'язок структура-властивості в низці інтерфероніндукуючих та противірусних лігандів ДНК: Звіт про НДР(заключний) /Фіз.-хім. ін-т ім. О.В. Богатського НАН України.– № ДР 0104U004313. – Одеса, 2006. – 250 с [48]     Ляхова Е.А. Синтез и биологическая активность гидразинсодержащих производных акридина, антрацена и флуорена: Автореф. дис. … канд. хим. наук: 02.00.10 / Одесса, 2005. – 22 с. [49]    Синтезы органических препаратов: Пер. с англ.: Сбор. 2. / Под ред. Казанского Б.А. – М.: Изд. ин. лит., 1949. – 655 с. [50]     Азейман Б.Ю., Швайгер М.О., Мандрик Т.П.. Зелепуха С.І., Кіпріанова О.А. Зіставлення антимікробної дії різних груп барвників з іх дією на ракові клітини аденокарциноми Ерлиха invitro // Мікробіологічний журнал – 1960 - т.ХХІІ. в 6. –С.52-61