Проектная работа Влияние внешних факторов на ферментативную активность амилазы слюны

МИНИСТЕРСТВО ОБРАЗОВАНИЯ И НАУКИДОНЕЦКОЙ НАРОДНОЙ РЕСПУБЛИКИГОСУДАРСТВЕННОЕ ПРОФЕССИОНАЛЬНОЕОБРАЗОВАТЕЛЬНОЕ УЧРЕЖДЕНИЕ«МАКЕЕВСКОЕ ПРОФЕССИОНАЛЬНО-ТЕХНИЧЕСКОЕ УЧИЛИЩЕСФЕРЫ УСЛУГ» Проектная работа "Влияние внешних факторов на ферментативную активность амилазы слюны" Проект выполнили: студенты группы № 54 Руководитель проекта: Малюта А.М., преподаватель биологии и химии ГОУ СПО "МПТУ СУ" Аннотация Проблема, которая затрагивается в проектной работе, актуальна, поскольку связана с вопросом здоровья. Практическая часть проектной работы представлена в виде отчета о результатах химических экспериментов, которые отражают степень воздействия внешних факторов на ферментативную активность амилазы. Опыты поставлены в соответствии четкой инструкцией, полученные достоверные результаты проанализированы и представлены в виде таблиц и диаграмм. В заключении подведены итоги и сделаны выводы. Цель: изучить влияние внешних факторов на активность амилазы слюны. Задачи: - изучить научную литературу по проблеме исследования;- провести химические эксперименты;- представить результаты в виде диаграмм и таблиц.Объект исследования: амилаза - фермент пищеварительной системыПредмет исследования: влияние внешних факторов на активность амилазыМетоды исследования: - анализ литературы;- химический эксперимент.База исследования: кабинет химии МПТУ СУ МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ 1. Специфичность амилазы слюныМетодика приготовления разбавленной слюны:Рот ополаскивают 2-3 раза водой для удаления остатков пищи. Отмеряют цилиндром 50 мл дистиллированной воды и ополаскивают ею рот в течение 3-5 мин. в несколько приёмов. Собранную жидкость фильтруют через вату и фильтрат используют для работы. Методика: В пробирку № 1 поместим 5 мл 5% раствор сахарозы.В пробирку № 2 поместим 5 мл 5% раствор крахмала.В обе пробирки добавим 5 мл слюны и 1-2 капли раствора йода. Опыт повторяем 4 раза.2. Действие активаторов и ингибиторов на амилазу слюныМетодика:В пробирку № 1 вносим 1 мл воды.В пробирку № 2 - 1 мл спирта. В пробирку № 3 – 1мл CuSO4. В пробирку № 4 – 1 мл раствора HCl. Во все пробирки вносим по 1 мл слюны, приливаем по 1 мл 5% раствора крахмала, капаем 1-2 капли раствора йода. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ 3. Влияние концентрации на активность амилазы слюныМетодика: Нумеруем 10 пробирок. В пробирку № 1 вносим 1мл воды, в следующие будем добавлять по 2 мл воды. Далее во все пробирки добавляем по 1 мл слюны, по 2 мл 5% раствора крахмала, капаем по 1-2 капли раствора йода.4. ТермолабильностьМетодика: В четыре пробирки наливаем по 5 мл 5% раствора крахмала. В № 1 вносим воду, t =100 оС.В № 2 – воду, t = -2оС. В № 3 – воду, t = 40оС. В № 4 – воду, t = 26оС. Через 10 минут добавляем 0,5 мл разбавленной слюны, капаем 1-2 капли раствора йода.5. Влияние pH среды на активность амилазы слюныМетодика: В пробирку № 1 вносим 1мл раствора кислоты HCl.В пробирку № 2 - 1мл раствора NaOH. В пробирку № 3 – 1 мл воды. Далее в пробирки добавляем 5 мл 5% раствора крахмала, 1 мл слюны, 1-2 капли раствора йода. синее окрашивание растворасо временемисчезнет амилаза + I2 крахмал 2 синее окрашивание растворасо временем не исчезает сахароза + I2 крахмал 1 Результаты Содержимое пробирок № пробирки ПРАКТИЧЕСКАЯ ЧАСТЬ 1. Специфичность амилазы слюны синее окрашивание раствораисчезает быстрее HCl амилаза крахмал 4 окраска растворане изменяется CuSO4 амилаза крахмал 3 окраска растворане изменяется Спирт амилаза крахмал 2 синее окрашивание растворасо временем исчезает вода амилаза крахмал 1 Окраска с йодом Содержимое пробирок № пробирки ПРАКТИЧЕСКАЯ ЧАСТЬ 2. Действие активаторов и ингибиторов на амилазу слюны ПРАКТИЧЕСКАЯ ЧАСТЬ 3. Влияние концентрации на активность амилазы слюны 12 минут синее окрашивание раствора со временем исчезает 26оС 4 7 минут синее окрашивание раствора со временем исчезает 40оС 3 за 15 минут не идет нет -2оС 2 нет нет 100оС 1 Время гидролиза Окраска с йодом Температура № пробирки ПРАКТИЧЕСКАЯ ЧАСТЬ 4. Термолабильность 6 синее окрашивание раствора со временем исчезает кислотная 3 10 синее окрашивание раствора со временем исчезает нейтральная 2 - синее окрашивание раствора не исчезает щелочная 1 Время гидролиза (мин) Окраска йодом pH среда № пробирки ПРАКТИЧЕСКАЯ ЧАСТЬ 5. Влияние pH среды на активность амилазы слюны Выводы Ферменты обладают специфичностью. Амилаза катализирует гидролиз крахмала, сахароза не катализирует гидролиз крахмала.Ионы Cl активирует амилазу, ионы металла Сu – ингибиторы ферментов, которые вызывает денатурацию белкаЧем меньше содержание слюны в растворе, тем медленнее проходит процесс гидролизаНаибольшую активность амилаза проявляет при t = 40оСНаибольшую активность амилаза проявляет в кислотной среде Литература Майсурян А.И. Энциклопедия для детей. Биология. – М., 1993Пасынский А.Г. Биофизическая химия. - М., 1993Розенгарт В.И. Ферменты – двигатели жизни. - СПб., 2001Смирнова Г.А. Основы биохимии. - М., 1995 Филиппович Ю.Б., Егорова Т.А., Севастьянова Г.А. Практикум по общей биохимии. – М., 1982Чекулаева Е.О. Я познаю мир. Биология. – М., 1999