Презентация по методам клинических лабораторных исследований на тему Исследование экссудатов и транссудатов

Презентация на тему:Исследование транссудатов и экссудатов К серозным полостям относят плевральную, брюшную полость, полость перикарда. Серозные полости представляют собой узкие щели, образованные покрывающими органы висцеральным париетальным листками серозной оболочки. Серозные полости и их содержимое Серозные оболочки состоят из нескольких слоев эластических и коллагеновых волокон с кровеносными и лимфатическими сосудами; покрыты слоем мезотелиальных клеток, лежащих на базальной мембране. У здорового человека в полости плевры, брюшины, перикарда имеется незначительное количество жидкости, которое только увлажняет покровы органов и способствует легкому скольжению их при дыхании, перистальтике, работе сердца.При некоторых патологических состояниях в этих полостях может накапливаться значительное количество жидкости. В соответствии с существующей классификацией выпотные жидкости делят на экссудаты и транссудаты. Отдельно выделяют жидкость кистозных образований. Транссудаты появляются вследствие разнообразных причин: изменение проницаемости сосудистых стенок; повышения внутри капиллярного давления; расстройства местного и общего кровообращения (при сердечно-сосудистой недостаточности, циррозах печени; снижении онкотического давления в сосудах; нефротическом синдроме и др.) Обычно это прозрачная жидкость светло-желтого цвета слабощелочной реакции. Изменение цвета и прозрачности может наблюдаться в геморрагических и хилезных транссудатах. Относительная плотность жидкости колеблется от 1,002 до 1,015, белок имеет концентрацию 5 – 25 г/л. Экссудаты образуются в результате воспалительных процессов, вызываемых различными причинами. Это жидкость щелочной реакции, относительная плотность которой выше 1,018, а концентрация белка более 30 г/л. Экссудаты бывают серозные и серозно-фибринозные (при ревматических плевритах, плевритах и перитонитах туберкулезной этиологии ), серозно-гнойные и гнойные (при бактериальных плевритах и перитонитах ); геморрагические (чаще всего при злокачественных новообразованиях, реже при инфаркте легкого, геморрагических диатезах, туберкулезе), хилёзные (при затруднении лимфооттока через грудной проток вследствие сдавления опухолью, увеличенными лимфоузлами, а также при разрыве лимфатических сосудов, обусловленном травмой или опухолью), холестериновые (застарелые, осумкованные выпоты, содержащие кристаллы холестерина), гнилостные (при присоединении гнилостной флоры). Выпотные жидкости получают путём пункции соответствующей полости. Полученный материал собирают в чистую сухую посуду. С целью предотвращения свертывания добавляют цитрат натрия из расчета 1 г на 1 л жидкости или раствор цитрата натрия (38 г/л) в соотношении 1:9. Определение физико-химических свойствЦвет жидкости различен в зависимости от характера выпота. Транссудаты и серозные экссудаты светло-желтого цвета. Гнойные экссудаты обычно желтовато-зеленые с бурым оттенком от наличия крови. Большая примесь крови придает жидкости красно-бурый оттенок (геморрагический экссудат). Молочно-белый цвет характерен для хилёзных экссудатов. Холестериновый экссудат желтовато-буроватый, иногда с коричневым оттенком. Прозрачность жидкости также зависит от характера выпота. Транссудаты и серозные экссудаты прозрачны. Геморрагические, гнойные, хилезные – мутные. Свойства транссудатэкссудатцветЛимонно-желтыйЛимонно-желтый, зеленовато-желтый, бурый, желтый, буровато-красный, кровянистый, молочно-белыйхарактерсерозныйСерозный, серозно-гнойный, гнойный, гнилостный, геморрагическиймутностьПрозрачный или слегка мутноватыйРазная степень помутненияОтносительная плотность< 1,015> 1,015свертываемостьНе свертываетсясвертываетсябелок< 30г/л> 30г/лПроба РивальтаотрицательнаяположительнаяКлеточный составВ основном лимфоцитыРазличные лейкоциты, макрофаги, мезотелий, частью в состоянии пролиферации (разное количество), эритроциты, кристаллы холестерина, капли жира, элементы злокачественных новообразованийБактериальный составОбычно стериленМикобактерии туберкулеза, стрептококки, стафилококки Определение относительной плотности проводят с помощью урометра. Количественное определение белка осуществляют так же, как в моче с сульфосалициловой кислотой (30 г/л). Поскольку в выпотной жидкости всегда содержится белок в значительно большем количестве, чем в моче, готовят основное разведение выпотной жидкости в 100 раз, для чего к 0,1 мл выпотной жидкости приливают 9,9 мл раствора хлорида натрия (9 г/л). При очень высоком содержании белка в экссудате разведение можно продолжать, пользуясь основным разведением. Расчет производят по калибровочному графику с учетом степени разведения жидкости. Проба Ривальта предложена для дифференцирования транссудатов и экссудатов. Экссудат содержит серомуцин (вещество глобулиновой природы), дающий положительную пробу Ривальта. Ход определения В цилиндр емкостью 100 мл с дистиллированной водой, подкисленной 2-3 каплями концентрированной уксусной кислоты, добавить 1-2 капли исследуемой жидкости. РезультатЕсли падающие капли образуют беловатое облачко (напоминает дым от сигареты), опускающееся до дна цилиндра, - проба положительная. В транссудате помутнение по ходу капли не появляется либо проявляется очень слабо и быстро исчезает. Проба Ривальта не всегда позволяет отличить транссудат от экссудата при смешанных жидкостях. Большое значение для их отличия имеет микроскопическое исследование. Микроскопическое исследованиеМикроскопическое исследование выпотных жидкостей проводят после центрифугирования в течение 5-10 мин при 1500 – 3000 об./мин и приготовления препаратов из осадка. Микроскопическое исследование следует производить в нативных и окрашенных препаратах. Нативные препараты Каплю осадка наносят на предметное стекло и накрывают покровным стеклом, микроскопируют, используя окуляр 7, объектив 40. Исследование нативных препаратов дает возможность ориентировочно судить о характере патологического процесса, количестве клеточных элементов, преобладании различных форменных элементов, наличии комплексов клеток опухолевой природы, кристаллов и других элементов. Лейкоциты в небольшом количестве (до 10-15 в поле зрения) обнаруживаются в транссудатах и в большом количестве в жидкостях воспалительного происхождения. Особенно их много в гнойном экссудате. Соотношение отдельных видов лейкоцитов исследуют в окрашенных препаратах. 11111Рис. «Клеточный состав транссудатов и экссудатов»1 – мезотелий;2 – нейтрофильные гранулоциты, в том числе с псевдопикнозом ядра;3 – лимфоциты;4 – плазматическая клетка;5 – моноциты;6 – эозинофильный гранулоцит. Эритроциты в том или ином количестве присутствуют в любой жидкости. В транссудатах и серозных экссудатах их выявляют в небольшом количестве за счет травматической примеси крови (в момент прокола). Геморрагические экссудаты обычно содержат очень много эритроцитов.11111Эритроциты в выпотнойжидкости Клетки мезотелия – крупные клетки размером до 25 мкм и более. Обнаруживаются в большом количестве в транссудатах, располагаются одиночно, иногда в виде скоплений. Иногда выявляются выраженные дегенеративные изменения в виде вакуолизации цитоплазмы (перстневидные клетки).Рис. Клеточный состав экссудатов1 – эритроцит;2 – нейтрофил;3 – лимфоцит;4 – эозинофил;5 – полибласт;6 – макрофаг,7 – мезотелий. Опухолевые клетки расположены обычно в виде комплексов без четких границ с выраженными признаками полиморфизма величины и формы.Рис. Клеточный состав экссудатов1 – опухолевый комплекс. Жировые капли в виде резко преломляющих свет круглых капель, окрашивающихся суданом ІІІ в оранжевый цвет, встречаются в гнойных экссудатах с выраженным клеточным распадом и в хилезных экссудатах.Жировые капли Кристаллы холестерина – бесцветные прозрачные пластинки с обломанными углами в виде ступенек. Обнаруживаются в старых осумкованных холестериновых экссудатах, чаще туберкулезной этиологии. Небольшую каплю осадка помещают на предметное стекло. Препарат готовят так же, как мазок крови, высушивают на воздухе. Окраску производят после фиксации мазков обычными гематологическими красителями.Окрашенные препараты Клеточные элементы экссудатов окрашиваются быстрее, чем элементы крови, поэтому время окраски сокращается до 8-10 мин. В мазках подсчитывают процентное соотношение отдельных видов лейкоцитов, исследуют морфологию других клеточных элементов В окрашенных препаратах обнаруживают следующие клеточные элементы:Нейтрофилы – преобладающие клетки гнойного экссудата. По морфологии нейтрофилов (токсогенная зернистость и вакуолизация цитоплазмы, гиперсегментация и пикноз ядер, кариорексис вплоть до клеточного распада) наблюдаются при наиболее тяжелых случаях гнойного воспаления. Нейтрофилы с явлением фагоцитоза встречаются при более доброкачественных процессах. Лимфоциты являются преобладающими клетками серозного экссудата (до 80 – 90 % всех лейкоцитов). В небольшом количестве встречаются и в транссудатах. Морфология их не отличается от таковой в периферической крови.Лимфоциты Эозинофилы рассматривают как проявление аллергического процесса. Преобладание эозинофилов (20 – 70 % всех лейкоцитов – эозинофильный плеврит) наблюдается при ревматических выпотах, туберкулезе, опухолях, паразитарных заболеваниях.Эозинофилы Плазматические клетки могут встречаться при затяжном характере воспаления серозных оболочек.Гистиоциты – тканевые моноцитоидной формы и серовато-голубой цитоплазмой. Часто обнаруживаются в гнойных экссудатах в период санации полости.Макрофаги – полиморфные клетки с ядром неправильной, бобовидной формы с включениями в цитоплазме. Обнаруживаются при кровоизлияниях в плевральную полость, опухолях, гнойных плевритах.Рис. Альвеолярные макрофаги, содержащие гемосидерин а) в нативном препарате;б) окраска на берлинскую лазурь Клетки мезотелия выстилают серозные оболочки (покровный эпителий). Они крупных размеров (до 30 мкм) округлой формы с центрально, иногда эксцентрично расположенным круглым ядром и широкой цитоплазмой, окрашенной от серого до темно-голубого цвета. Могут быть иногда двухъядерные и многоядерные.Рис. «Клеточный состав транссудатов и экссудатов»1 – мезотелий;2 – нейтрофильные гранулоциты, в том числе с псевдопикнозом ядра;3 – лимфоциты;4 – плазматическая клетка;5 – моноциты;6 – эозинофильный гранулоцит. Клетки мезотелия постоянно обнаруживаются в транссудатах, в экссудатах в начальной стадии воспалительного процесса при реактивном раздражении плевры, а также при опухолях. В жидкостях большой давности отмечаются выраженные дегенеративные изменения этих клеток (вакуолизация цитоплазмы, эксцентрично расположенное ядро). Клетки злокачественных опухолей обнаруживаются при канцероматозе плевры, брюшины вследствие первичного (мезотелиома) или вторичного (прорастание из соседних и метастазирование из других органов) поражения. Однако в большинстве случаев трудно решить вопрос, является опухоль первичной или вторичной. Клетки имеют обычно крупный размер (до 40-50 мкм) с выраженным полиморфизмом (различная величина, структура и окраска ядер, цитоплазма базофильная, часто вакуолизированная). Достоверным для диагноза является обнаружение комплексов клеток с выраженными признаками злокачественности. Содержимое кистозных полостей. Кисты могут возникать в различных органах (яичниках, почках, печени и др.). Разные кисты могут содержать жидкость различного характера (серозную, гнойную, геморрагическую и т.д.). От характера жидкости зависит ее прозрачность и цвет (желтоватая, кровянистая и др.). При микроскопическом исследовании обычно обнаруживают лейкоциты, эритроциты, клетки, выстилающие кисту (часто в состоянии жировой дистрофии). Могут быть кристаллы холестерина, гематоидина, жирных кислот. В коллоидных кистах выявляют коллоид, в дермальных кистах – клетки плоского эпителия, волосы, кристаллы жирных кислот, холестерина. Эхинококковые кисты (пузыри) содержат прозрачную жидкость с низкой относительной плотностью (1,006 – 1,015). В жидкости находятся глюкоза, хлорид натрия, янтарная кислота и ее соли. Белка нет. Он появляется лишь при развитии воспалительного процесса в кисте. При прорыве эхинококкового пузыря в бронх, в плевральную или брюшную полость в мокроте, плевральной или асцитической жидкости при микроскопическом исследовании выявляют характерные крючья эхинококка и куски исчерченной параллельными линиями хитиновой оболочки пузыря. Можно найти и сколексы – головки с двумя венчиками крючьев и четырьмя присосками. Кроме того, в исследуемом материале могут быть обнаружены клетки с жировой дистрофией и кристаллы холестерина. Бактериоскопическое исследование Из осадка готовят два препарата: один окрашивают по Цилю-Нильсену, другой – по Граму. В окрашенных препаратах могут быть обнаружены микобактерии туберкулеза, редко стрептококки, стафилококки, диплококки. Транссудаты обычно стерильны, а экссудаты содержат различную бактериальную флору. Гораздо более эффективен метод посева.