Методическая разработка практического занятия для студентов Венерические заболевания и инфекции передаваемые половым путем (ИППП) 2 курс

Министерство здравоохранения Амурской области
Государственное автономное учреждение амурской области профессиональная образовательная организация
«амурский медицинский колледж»
методическая разработка практического занятия
для студентов
ПМ.01 Проведение лабораторных общеклинических исследований
МДК 01.01. Теория и практика лабораторных общеклинических исследований
специальность 31.02.03 Лабораторная диагностика
квалификация Медицинский технолог
Занятие №6
Тема: Венерические заболевания и инфекции, передаваемые половым путем (ИППП)

Благовещенск -2015
Рассмотрено
на заседании ЦМК спец. дисциплин
«Лабораторная диагностика»
Протокол №________
«_____»___________________2015 г.
Председатель ЦМК
Маятникова Н.И. _______________
Утверждаю
Зам. директора по НМР
М.А. Сидоренко___________________
«_____»____________________2015 г.
Методическая разработка практического занятия для студентов разработана в соответствии с Рабочей программой профессионального модуля ПМ.01 Проведение лабораторных общеклинических исследований междисциплинарного курса МДК 01.01. Теория и практика лабораторных общеклинических исследований и требованиям ФГОС по специальности 31.02.03 Лабораторная диагностика по профессии «Медицинский технолог».
Организация-разработчик: ГАУ АО ПОО «Амурский медицинский колледж».
Разработчик:
Игитханян Наталья Сергеевна, кандидат медицинских наук, преподаватель ГАУ АО ПОО «Амурский медицинский колледж» высшей квалификационной категории.
Методическая разработка цикла практических занятий для преподавателя рассмотрена на заседании ЦМК специальных дисциплин, и рекомендована к использованию при обучении студентов медицинского колледжа.
Список использованной литературы:

Методы клинических лабораторных исследований / под ред. проф. В.С. Камышникова. – 4-е изд. – М. : МЕДпресс-информ, 2011. – 752 с. :ил. (Стр. 342-344).
Кишкун А.А. «Руководство по лабораторным методам диагностики», Москва, «ГЕОТАР – МЕДИА, 2007г.
http://cldtest.ruhttp://www.clinlab.infoЗанятие № 6.
Тема: Венерические заболевания и инфекции, передаваемые половым путем (ИППП).
Цель: Изучить морфологические особенности возбудителей половых инфекций.
44824651413510
Задачи.
Студенты должны знать:
Клинико-диагностическое значение исследования отделяемого половых органов.
Технику взятия материала на лабораторное исследование;
Клиническую картину заболеваний передающихся половым путем
Студенты должны уметь:
Производить приготовление окрашенных препаратов для определения микроскопической картины отделяемого половых органов;
Производить микроскопическое исследование исследуемого биологического материала;
Дифференцировать нормальные и патологические элементы (возбудителей) отделяемого половых органов (сифилис, гонорея трихомониаз).
Регистрировать полученные результаты исследования.
В соответствии с требованиями ФГОС:
Цели занятия:
Формирование элементов ПК 1.1. Готовить рабочее место для проведения лабораторных общеклинических исследований через применение знаний правил работы и техники безопасности в клинической лаборатории и выработку умений готовить биологический материал, реактивы, лабораторную посуду и аппаратуру для общеклинических исследований;
Формирование элементов ПК 1.2. Проводить лабораторные общеклинические исследования биологических материалов; участвовать в контроле качества через применение знаний оборудования, правил работы с и выработку умений исследовать биологический материал (отделяемое половых органов): производить микроскопическое исследование мазков;
Формирование элементов ПК 1.3. Регистрировать результаты лабораторных общеклинических исследований через применение знаний и выработку умений вести учетно-отчетную документацию;
Формирование элементов ПК 1.4. проводить утилизацию отработанного биологического материала, дезинфекцию и стерилизацию использованной лабораторной посуды, инструментария и средств защиты через применение знаний, техники безопасности при работе в лаборатории клинических исследований, выработки умений проводить утилизацию отобранного материала, дезинфекцию и стерилизацию использованной лабораторной посуды, инструментария, средств защиты, рабочего места и аппаратуры.
Контроль и коррекция знаний по теме «Венерические заболевания и инфекции, передаваемые половым путем (ИППП)».
Оснащение занятия:
Наглядные пособия:
печатные пособия (методическая разработка практического занятия для преподавателя, методическая разработка практического занятия для студентов);
проекционный материал (презентация).
Технические средства обучения:
Мультимедиа
3. Специальное оборудование:
Микроскопы
Иммерсионное масло
Готовые окрашенные препараты
Реактивы:
Набор реактивов: по Романовскому-Гимзе, 0,1% метиленовый синий, набор кардиолипиновый (реакция Вассермана).
Место проведения занятия:
Учебная комната
Рекомендуемая литература:
Конспект лекций.
Методики клинических лабораторных исследований. Справочное пособие. В 3-х т. Под ред. В.В. Меньшикова. – М., Лабора. 2008. – 448 с.
Методы клинических лабораторных исследований / под ред. проф. В.С. Камышникова. – 4-е изд. – М. : МЕДпресс-информ, 2011. – 752 с.: илл.
Этапы практического занятия
Организационный момент.
Контроль исходного уровня знаний.
Инструктаж и самостоятельное выполнение практической работы.
Контроль и коррекция полученный новых знаний и умений.
Подведение итогов занятия и выставление оценок.
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ К ВЫПОЛНЕНИЮ САМОСТОЯТЕЛЬНОЙ ПРАТИЧЕСКОЙ РАБОТЕ
Задание №1. Изучите и кратко законспектируйте теоретический материал
Актуальность темы:
Во всем мире инфекции передаваемые половым путем являются одной из важных социальной и медицинской проблемой. Инфекции, передаваемые половым путем (ИППП), ранее именовались как болезни или заболевания. Эта группа насчитывает 22 нозологические формы, в которую входит и группа «венерические заболевания».
К венерическим заболеваниям относится: сифилис, гонорея, мягкий шанкр, и так называемые IV и V венерические болезни - это лимфогранулема венерическая и паховая гранулема, вызываемые хламидиями.
Актуальность проблемы ИППП, несомненна и обусловлена прежде всего тем, что:
Нет единой базы данных по заболеваемости ИППП;
Нет единого алгоритма лабораторной диагностики и лечения ИППП;
Возросла устойчивость возбудителей ИППП к широкому спектру антибиотиков;
Люди занимаются самолечением и черпают информацию о лечении и симптомах из интернета;
ИППП- это инфекции, которые передаются половым путем и условно-половым путем, вызывающие поражения мочеполовой системы.
Общие клинические проявления ИППП:
Малосимптомное, нередко бессимптомное течение болезни.
Одновременное заражение несколькими возбудителями.
Зуд, жжение, высыпание.
Лабораторная диагностика:
Микроскопический метод
- окраска метиленовым синим, по Грамму, по Романовскому-Гимзе.
Культуральный метод
а) посев на специальные питательные среды.
б) выделение чистой культуры.
в) идентификация возбудителя.
Молекулярно-биологические методы
- имунно-ферментный анализ (ИФА), определение специальных антител.
Иммунобиологический метод
- Полимеразно-цепная реакция (ПЦР), выявление ДНК частиц возбудителя.
ИППП, и их возбудители
№ Нозологическая форма Возбудитель
1 Сифилис Бледная трепонема (спирохета)
2 Гонорея Гонококк
3 Мягкий шанкр (шанкроид) Гемофильная бацилла (палочка Дюкрея)
4 Лимфогранулема венерическая
(IV венерическая болезнь) Хламидии
5 Паховая гранулема (V венерическая болезнь) Хламидии
39109656604635Сифилис – одно из распространенных венерических заболеваний передающихся половым путем.
Возбудитель: бледная трепонема.
Морфология возбудителя: спиралевидно закрученный бактериальный микроорганизм (анаэроб), имеющий от 5 до 24 равномерных завитков. Длина до 7-14мкм. Характерно 4 основных вида движений:
Поступательный (вперед-назад);
Вращательный (вокруг собственной оси);
Сгибательное («маятниковое»);
Контрактильное (волнообразное).

Возбудитель не устойчив во внешней среде, чувствителен к антисептическим средствам, кипячению, но может долго сохраняться во влажной среде (белье, носовой платок, зубная щетка и т.д.)
Источник инфекции: больной человек
Пути передачи: через половой контакт, отделяемое половых органов, эякулят, молоко, кормящей женщины, предметы обихода (столовые приборы, стаканы, зубные щетки).Инкубационный период: в среднем составляет 21 день, но может и от 8 дней до 5 месяцев).Заражение несколькими возбудителями: возможно, чаще всего с хламидиозом (36-72%).
Клиническая картина:
Первичный период - длится 6-7 недель. Характерно появление твердого шанкра на месте внедрения возбудителя и через 6-7 дней увеличением лимфоузлов;
Вторичный период – длится от 2 до 4хлет, имеет волнообразное течение с обилием высыпаний и воспалительных очагов в разных тканях и органах. В основном поражаются кости, суставы, ЦНС;
Третичный сифилис – встречается редко, начинается остро на 3-4 году болезни. Образуются воспалительные бугорки (гуммы), тяжелое течение, обезображивание внешности (инвалидизация).
Лабораторная диагностика:
33489906938010Проводится серологическими реакциями на сифилис (реакция Вассермана – RW (реакция связывания комплемента) и экспресс-метод на стекле (кровь из пальца) с кардиолипиновым и трепонемными антигенами.Выраженность гемолиза при РВ обозначается плюсами: резко положительная - 4 +; положительная - 3 +; слабоположительная - 2 + или 1 +; отрицательная «-». Имеет значение и постановка реакции по количественному методу, т. е. с различными разведениями ''сыворотки (1:10; 1:20 и т.д. до 1:320). Кровь при проведении реакции Вассермана, необходимо брать натощак или спустя 6часов после еды, во избежания ложноположительных результатов.

Рис. 1. Результаты реакции Вассермана:
а - полная задержка гемолиза (+ + ++); б - выраженная задержка гемолиза (+ ++); в - частичная задержка гемолиза (++); г - слабая задержка гемолиза (+); д - полный гемолиз (-). Реакция положительна при частичной, выраженной и полной задержке гемолиза, определяемой по степени окрашивания содержимого пробирок от светло-розового до ярко-красного негемолизированные эритроциты впоследствии образуют осадок красного цвета. 
-1562104975860Экспресс-метод (микрореакция на стекле): В этой реакции, так же используют кардиолипиновый антиген, одну каплю которого смешивают с 2-3 каплями сыворотки крови обследуемого человека в лунках специальной стеклянной пластины. Реакция протекает по механизму преципитации.
Общая продолжительность постановки реакции 10-40 мин.
Результат оценивают по качеству выпавшего осадка и величине хлопьев; выраженность реакции обозначают плюсами: 4 (++++), 3 (+++), 2 (++), 1(+). Микрореакция на стекле менее специфична для больных сифилисом, чем РВ, но несколько превосходит ее по чувствительности.
Ложноположительные результаты при экспресс-методе получают чаще, чем при РВ. Поэтому этот метод разрешен для применения только как отборочная реакция при массовых обследованиях населения, диспансеризации и обследовании больных в клинико-диагностических лабораториях соматических больниц.
Гонорея - это инфекционное заболевание, вызываемое гонококками и передаваемое половым путем, с преимущественным поражением мочеполовой системы.
4844415737235Возбудитель: гонококк, род Neisseria, был открыт Альбертом Нейсером в 1869 году, в честь него и назван род возбудителя.
Морфология возбудителя: гонококки - это грамотрицательные диплококки, они имеют вид боба, располагаются парами, прилегая друг к другу вогнутой стороной и напоминают вид «кофейных зерен». Размножаются во взаимно-перпендикулярных плоскостях.
Источник инфекции: больной человек.
Пути передачи: половой, реже через предметы обихода. Заражение ребенка происходит при прохождении его через родовые пути матери.
Инкубационный период: от 1-5 дней до 2-3 недель.
Клиническая картина:
Различают:
свежую (с длительностью заболевания до 2 мес), которую подразделяют на острую, подострую и торпидную (малосимптомную или асимптомную со скудным экссудатом, в котором обнаруживают гонококков);
хроническую (продолжительностью более 2 мес или с неустановленной давностью заболевания). Хроническая гонорея может протекать с обострениями.
гонококконосительство (возбудитель не вызывает появление экссудата и отсутствуют субъективные расстройства).
Симптомы:
у мужчин: боль и резь при мочеиспускании
гнойные выделения по утрам перед мочеиспусканием с неприятным запахом;
воспаление губок уретры мочеиспускательного канала.
у женщин: боли, жжение, неприятные гнойные веделенияЛабораторная диагностика:
Порядок диагностики гонореи:
1. Микроскопия (анализ свежеокрашенного мазка, взятого из 3-х точек: U,V,C), при остром течении гонореи возбудитель располагается в основном внутри лейкоцитов, а при хроническом - внеклеточно. Характерна картина «чистого» мазка (сплошь расположены гонококки).2. Бактериологическое исследование, с определением чувствительности к антибактериальным препаратам.
Показания:
• неоднократное получение отрицательного результата бактериоскопии;• наличие в мазках из патологического материала подозрительных на гонококк микроорганизмов;• при клиническом или эпидемиологическом подозрении на гонорею.
3. Реакция иммунофлюоресценции (РИФ).4. Иммунофлюоресцентный анализ (ИФА).5. Молекулярные методы: полимеразная цепная реакция и лигазная цепная реакция (ПЦР, ЛЦР).6. При отсутствии гонококков в мазках и посевах проводятся провокационные пробы с использованием иммунологических, химических, термических методов, обязательно учитываются возможные осложнения и последствия при их проведении:
1) химическая - смазывание уретры на глубину 1—2 см 1—2 % раствором нитрата серебра, прямой кишки на глубину 4 см 1 % раствором Люголя в глицерине, цервикального канала на глубину 1—1,5 см 2—5% раствором нитрата серебра;2) биологическая - введение внутримышечно гоновак-цины в дозе 500 млн. микробных тел или одновременное введение гоновакцины с пирогеналом в дозе 200 МПД;3) термическая - ежедневная диатермия в течение 3-х дней (в 1-й день в течение 30 мин, во 2-й день - 40 мин, в 3-й — 50 мин) или индуктотермия в течение 3-х дней по 15-20 мин. Отделяемое для лабораторного анализа берется ежедневно через 1 час после физиотерапевтических процедур;4) физиологическая - взятие мазков в дни менструации;5) комбинированная - проведение биологической, химической и термической провокационных проб в один день. Отделяемое берётся через 24, 48 и 72 часа, а посевы проводятся через 72 часа после проведения комбинированной пробы.
Взятие материала на исследование:
У мужчин материал берут из уретры, утром до первого мочеиспускания, и исследуют мочу, собранную утром после длительного воздержания мочеиспускания.
У женщин, девочек – из уретры, влагалища, прямой кишки, путем смыва.
Методы окраски мазков:
Метиленовым синим - метод быстрый, но не информативен, т.к. все клеточные элементы окрашиваются в синий цвет и гонококки легко спутать с
измененными клетками.

Рис.2. Окраска 0,1% метиленовым синим
По Граму – метод трудоёмкий, очень информативен, т.к. на глубоком фоне грамм – диплококки окрашиваются в красный цвет. Отчетливо видно их расположение парами в виде «кофейных зерен», как внеклеточно, так и внутриклеточно в лейкоцитах.

Рис.3. Окраска по ГрамуОсобенность инфекции заключается в том, что гонококки подавляют флору и любит господствовать один, причем в 1 лейкоците может быть более 100 гонококков.

Рис.4 Внеклеточное и внутриклеточное расположение гонококков
Трихомониаз – это инфекционное заболевание, вызываемое влагалищной трихомонадой и передающийся половым путем, с преимущественным поражением мочеполовой системы, чаще протекает как смешанная инфекция.
righttopВозбудитель: влагалищная трихомонада, паразитирует в мочеполовых путях, часто ее можно увидеть в моче по характерному (волнообразному) движению.
41871901946910Морфология возбудителя: имеет грушевидное тело, на переднем конце которой, располагаются 4ре жгутика. Цитоплазма имеет вакуоли. Высокая способность к фагоцитозу («пожирает») микроорганизмы, соседствует с гонококком и гарднереллой.
Пути передачи: половым путем и предметами общего пользования.
Инкубационный период: 4 дней до 3 недель
Клиническая картина: боль, жжение, сильный зуд, серозно-гнойное выделение, зуд в уретре.
Лабораторная диагностика:
исследование основано на:
микроскопии нативного препарата
и окрашенного по Романовскому.
Приготовление нативного препарата: каплю отделяемого из влагалища взятой пипеткой или петлей, наносят на предметное стекло, покрывают покровным стеклом и сразу же микроскопируют.
Таким образом, в нативном препарате обнаруживают подвижные формы, которые распознаются по мере движения удулирующей мембраны. При потере движения микроорганизм распознать нельзя.

Рис.5 Нативный препарат (обнаружены трихомонады)
Окрашенные препараты: предположено много различных методов, но из всех удобным является метод Романовского. Для этого каплю отделяемого распределяют тонким слоем по предметному стеклу, высушивают и красят по методике. При этой окраске трихомонады распознаются легко - ядро фиолетовое, цитоплазма голубая, содержит бактерии.


Рис.6,7 Окрашенный препарат по Романовскому-Гимзе
(обнаружены трихомонады)
Задание №2. Самостоятельная работа с исследовательским этапом
Получите у преподавателя окрашенные мазки;
Изучите микроскопическую картину урогенитальных мазков;
Определите патологические составляющие мазков и зарисуйте их в рабочие тетради;
Опишите морфологическую характеристику каждого элемента в мазках;
Предположите диагноз;
Заполните бланк анализа;
Сдайте рабочую тетрадь и бланк на проверку преподавателю.
Закрепление изученного материала.
Задание №3. Изучите вопросы самоконтроля и ответьте письменно в рабочих тетрадях, используя в качестве закрепления рабочую тетрадь.
№ Вопрос Ответ
1 Особенностью этой инфекции является обнаружение в мазках «попарно расположенных диплококков» 2 Этот возбудитель имеет характерное ундулирующее (волнообразное) движение мембраны и 4 жгутика на переднем конце тела 3 Особенностью этого возбудителя является способность к фагоцитозу микроорганизмов и благоприятное соседство с другими видами возбудителей 4 Возбудитель этой инфекции имеет длинное тело, закрученный вид, с равномерными завитками от 5 до 25шт. 5 Для определения наличия этого заболевания используют реакцию Вассермана и экспресс-методы на стекле 6 Картина «чистого» мазка характерна для … 7 При окраске по Граму эти элементы окрашиваются в красный цвет, а все остальные элементы в синий 8 Инкубационный период трихомониаза составляет… 9 Какой возбудитель был открыт А. Нейссером10 Одним из ярких клинических проявлений гонореи является Домашнее задание
1.Учить конспект занятия «Венерические заболевания и инфекции, передаваемые половым путем (ИППП)»;
2. Методы клинических лабораторных исследований / под ред. проф. В.С. Камышникова. – 4-е изд. – М. : МЕДпресс-информ, 2011. – 752 с. :ил.
3. Подготовить сообщение, презентацию, видео-сюжет по ИППП (хламидиоз, микоплазмоз, уреаплазмоз, кандидоз, гарднереллез, цитомегаловирусная инфекция, генитальный герпес, паппиломавирусная инфекция).